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les avoir isolés à l'aide d'une dissection, dans une solution d'acide osmique à 

 un pour cent. 



On les y laisse quelque temps jusqu'à ce qu'ils commencent à noircir. On les 

 lave alors dans l'eau distillée (1), puis on les transporte sur une lame de verre 

 dans une grosse goutte de picrocarminate où on les laisse séjourner au moins 

 48 heures jusqu'à ce que l'on obtienne une bonne coloration des noyaux. On les 

 recouvre alors d'une lamelle de verre sous laquelle on a placé une bande de 

 papier pour empèrher l'écrasement de l'objet, et sous cette lamelle, on fait passer 

 un C()urant d'eau qui enlève le picrocarminate et est renijjlacée finalement elle- 

 même par un mélange d'eau et de glycérine puis par delà glycérine presque pure (2). 



Le picrocarminate est souvent le meilleur colorant pour les tissus conjonctif, 

 musculaire, épitliélial; il est d'un usage constant dans les fines préparations 

 d'histologie. 



Acide osmique. — On peut employer ses solutions au centième ou aux 

 deux millièmes. Les objets que l'on fixe à l'aide de ce réactif, se trouvent par ce 

 fait seul légèrement teintés en noir; les contours des cellules sont devenus plus 

 fortement accusés, certaines régions plus foncées; en un mot il s'est produit une 

 coloration. Sur des faisceaux musculaires ainsi fixés, on peut déjà étudier la 

 structure de la fibre musculaire; et en faisant agir cet acide sur un fragment de 

 membrane séreuse de vertébré, telle que le grand épiploon d'un chien ou d'un 

 lapin, par exemple, on distingue nettement les cellules épithéliales qui la 

 recouvrent. 



Mais à vrai dire, la coloration par ce moyen n'est complète que si l'on emploie 

 ensuite, comme je l'ai déjà indiqué, le picrocarminate d'ammoniaque ou le 

 carmin à l'alun, de telle sorte que les limites des cellules soient marquées en noir 

 et leurs noj^aux en rouge, et deviennent également visibles. On peut aussi, au 

 lieu d'employer successivement l'acide osmique et le carmin à l'alun, les faire 

 agir ensemble. Pour cela, on fait une solution sans proportions bien précises, qui 

 consiste à mettre dans cinquante centimètres cubes d'eau assez de carmin pour 

 obtenir un liquide rouge, et quelques gouttes de la solution d'acide à deux pour 

 mille. On ne peut plonger dans ce mélange que de ti-ès petits objets, à cause du 

 peu de pénéti-ation des réactifs colorants; et il faut les y laisser séjourner de 

 24 à 48 heures. Mais les résultats sont parfois d'une netteté admirable. 



Il est très utile de faire agir d'abord l'acide osmique sur les objets que l'on doit 

 conserver dans la glj^érine, parce que celle-ci éclaircit ordinairement les tissus 

 à un tel point que l'on finit par n'y plus rien voir, tandis que le noir de l'acide 

 a le défaut contraire de foncer de plus eu plus, si bien que finalement toute la 

 préparation peut devenir noire. Ces deux défauts se contredisent utilement; de 

 plus, la solidité que l'acide donne aux éléments histologiques, leur permet de 

 résister aux déformations que produit souvent la glycérine. Quant à la façon 

 d'utiliser le réactif colorant en question, elle est très variable. Tantôt on fait 

 tomber, à l'aide d'une pipette, quelques gouttes de l'une de ses solutions, sur un 

 tissu vivant mis à nu par une dissection, tantôt on doit séparer le tissu ou l'objet 

 pour les transporter dans une plus grande quantité de la solution. Enfin, après 

 l'emploi de ce réactif, il faut toujours laver l'objet dans l'eau assez longuement. 



Les débutants feront sagement, je crois, de s'en tenir quelque temps, à 

 l'emploi des réactifs dont j'ai parlé jusqu'ici; toutefois, je crois devoir indiquer 

 rapidement l'emploi de rhémato.x.yline et des couleurs d'aniline , parce que 

 certains objets sont réfractaires à toutes autres colorations que celles-là. 



(1) Kemarque. — Pour faire cette première partie de l'opération, il faut se munir de petits flacons 

 ti'ès peu élevés et à ouverture très large, dans lesquels on puisse facilement transporter, à l'aide 

 d'une pince, les fragments de nerfs. 



(2) Remarque. — Au lieu de terminer la préparation par la conservation dans la glycérine, on 

 aurait pu la finir dans le baume, en suivant une marche un peu différente, comme je l'ai déjà 

 indiqué. 



