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jouer un rôle actif dans la fixation de l'éosine (sur les flagelles des Proto- 

 zoaires en particulier). 



La technique à laquelle je me suis arrêté est la suivante : 

 Fixation de 3 à 5 jours dans le mélange cupro-picro-formol acétique ; 

 lavage à l'eau 24 à 48 heures ; montage des pièces comme à l'ordinaire. 

 Les coupes collées sur lame et les frottis sont colorés suivant la méthode 

 de l'hématoxyline ferrique de Heidenhaim (alun de fer 3%) ; puis après 

 dififérenciation, la préparation est mise à séjourner dans une solution 

 aqueuse à 1 0/0 d'éosine soluble à l'eau des Établissements Poii*ier (Saint- 

 Denis), ou de Griibler ; coloration de 2 heures à 24 heures, suivant l'objet 

 à colorer (de 2 à 4 heures pour les coupes ordinaires, 12 à 24 heures lorsque 

 l'on cherche à mettre en évidence certains cils et flagelles difficilement 

 colorables des Protozoaires) ; ensuite, lavage à l'eau distillée durant 

 quelques secondes pour enlever l'excès d'éosine ; la préparation est alors 

 plongée dans une solution aqueuse d'acide phosphomolybdique (non 

 altéré) à 1 pour 100 durant 5 à 10 minutes ; lavage à l'eau ordinaire 

 30 secondes ; en dernier lieu, verser sur la lame quelques gouttes d'une 

 solution aqueuse de vert-lumière à gr. 20 ou gr. 50 pour 100 ; laisser 

 en contact quelques secondes à une minute (rarement plus), suivant le 

 temps de durée de coloration dans l'éosine et de fixation dans l'acide 

 phosphomolybdique ; monter ensuite la pré^jaration dans la série des 

 alcools ou plus simplement rincer de suite directement à l'alcool éthy- 

 lique à 96^ ; la différenciation se fait dans l'alcool à 96» ; elle varie de 

 1 à 5 et même 10 minutes ou plus. Lentement l'éosine est déplacée par le 

 vert-lumière ; la différenciation est souvent très lente, et elle est d'autant 

 plus lente que l'action de l'acide phosphomolybdique a été plus pro- 

 longée ; on suit la différenciation au microscope et on l'arrête lorsque la 

 teinte verte est suffisamment apparue et électivement fixée ; dans le cas 

 où la coloration verte est jugée insuffisante, il suffit de laver à l'eau dis- 

 tillée, puis de replacer quelques instants la lame de verre dans la solution 

 colorante de vert-lumière et de procéder à nouveau à la différenciation 

 dans l'alcool à 96». 



Pour arrêter la différenciation, au sortir de l'alcool à 96^, on plonge la 

 préparation dans l'alcool amylique pur ; là se fait la déshydration en 5 

 ou 10 minutes sans aucune décoloration. Il est souvent utile de faire 

 passer dans la suite la préparation dans un second flacon renfermant 

 également de l'alcool amylique pur pour éliminer toute trace d'alcool 

 éthylique et d'acide phosphomolybdique. Puis, passages successifs dans 



