DEVELOPPEMENT DES LUCERN AIRES 11 



sont nécessaires pour l'observation de la segmentation. 



Pour les coupes des premiers stades de l'œuf à la planula, 

 j'avais d'abord essayé de centrifuger et de faire une double inclu- 

 sion à la photoxyline et la paraffine, mais avec peu de succès. 

 En effet, le cehtrifugeur, aux différentes opérations, recueillait 

 toutes sortes d'impuretés qui gênaient la confection des 

 coupes fines. 



Nous avons ensuite cherché un autre procédé : en laissant 

 pondre les animaux dans de petites cuvettes posées à plat 

 dans une eau calme, les œufs se déposaient au fond en grande 

 quantité et formaient un petit tas à plusieurs couches. Au 

 moment voulu, à l'aide d'un petit siphon, nous enlevions l'eau 

 le plus doucement possible, puis nous laissions couler le liquide 

 fixateur très lentement afin de ne pas disperser les œufs. Quand 

 l'opération réussissait bien, on obtenait un amas de plusieurs 

 centaines d'œufs, suffisamment adhérents entre eux pour que l'on 

 puisse les détacher ensemble sous forme d'une pellicule à l'aide 

 d'un pinceau et d'une aiguille; on les passait ensuite par les 

 alcools pour finalement les inclure directement dans la paraffine. 



La difficulté est plus grande avec les larves fixées qui n'ont 

 pas encore bourgeonné, car leur diamètre est à peine supérieur à 

 celui de l'ovule et on opère sur des individus isolés. A la rigueur, 

 on peut sous une bonne loupe détacher la larve à l'aide d'une 

 baguette de verre très effilée, sans l'endommager et avec une 

 pipette la passer par tous les liquides jusqu'à la paraffine, 

 mais on risque trop souvent de la perdre au cours de ces nom- 

 breuses opérations ; et même si l'on réussit à inclure la larve 

 dans la paraffine, l'orientation des coupes est presque toujours 

 impossible. Pour pouvoir orienter plus facilement les larves 

 presque sphériques et par conséquent sans points de repère 

 externes, j'ai employé un procédé qui, s'il ne réussissait pas 

 toujours, m'a paru tout au moins supérieur aux autres. Nous 

 faisions toutes les manipulations jusqu'à l'alcool absolu sur des 

 larves non détachées de la lame ; nous laissions alors couler 

 sur celle-ci un peu de photoxyline qui s'étalait en couche assez 



