Studii su gli Echinodermi 81 



La decalcificazione deve essere lenta e completa e pei'ciò è un'o- 

 perazione molto lunga, che spesso richiede 2 o 3 settimane ; per 

 es : volendo decalcificare degli Antedon adulti o dei piccoli Echi- 

 ni. Si ottiene una buona decalcificazione immergendo i pezzi, su- 

 bito dopo fissati, in Liquido di Muller, contenuto più tosto in 

 abbondanza in un largo recipiente. Quivi si lasciano per un tempo 

 più o meno lungo, secondo la grandezza degli animali. Trattan- 

 dosi di grossi pezzi, che richiedono un lungo soggiorno, è bene 

 mutare il liquido a più riprese, specialmente quando si vede che 

 comincia ad intorbidare. Quando si dispone di un materiale ab- 

 bondante, prima di levare i pezzi dal liquido decalcificante, è 

 prudente, per assicurarsi della completa decalcificazione, dissociare 

 con gli aghi uno degli animali. Qualsiasi piccolo nucleo di sale 

 calcareo che rimane nei tessuti, non solo impedisce di fare 

 buone sezioni, ma impedisce la uniforme e regolare diffusio- 

 ne del liquido colorante. Per pratica però posso dire, in teimi- 

 ne generale, che le piccole Oloturie di 3 e più mm. si lasciano 

 b 4 ore, e quelle più grandi, fino a 2 cm., 24 oi-e o 48 ore. 

 Le larve di Antedon munite di breve peduncolo, della lunghezza 

 complessiva di 2 o 5 mm., si tengono immerse nel Liquido di 

 Muller 1 ora e giadatamente di più a misura che sono divenu- 

 te più grandi. I piccoli Echini di 2 o 3 mm. di diametro tì o 

 7 giorni, quelli del diametro di l cm. 3 o 4 settimane. L' im- 

 mersione in questo liquido però non deve protrarsi ; perchè, in 

 tal caso, i tessuti si macerano. Come ho detto sopra, bisogna 

 perciò fare uso della dissociazione con gli aghi di uno dei pezzi. 



Dopo la decalcificazione, che con un po' di pratica si ottie- 

 ne abbastanza bene, i pezzi si lavano in alcool 35° „. Questo la- 

 vaggio dev'essere il più che possibile completo prima di fare i 

 passaggi negli Alcool più forti, e ciò si ottiene, mutando a più 

 riprese 1' Alcool a 35°/^, fino a che non si deposita nel fondo del 

 recipiente, una poltiglia di colorito giallastro. 



I pezzi che sono stati per uno o due giorni nell'alcool 70° o. 

 sono pronti per la colorazione. Questa si avrà facendo uso di dif- 



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