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La coloration de l'objet aussi bien que la coloration du milieu teile 

 qu'on la pratique ordinairement ne s'appliquent pas aux organismes vivants. 

 Ceux-ci se ret'usent, en effet, ä absorber les Solutions colorantes. Les excep- 

 tions que Brandt et Certes*) ont indiquees a cette regle ne sont qu'appa- 

 rentes. D'apres Brandt, on peut teindre le noyau des Protozoaires vivants 

 en violet pale par une Solution diluee d'hematoxyline, et les globules graisseux 

 de ces etres en brun au moyen de brun de Bismarck; Certes a retrouve 

 cette derniere action chez la cyanine ou bleu de quinoleine. Mais dans 

 toutes ces experiences le protoplasuie proprement dit demeure incolore et — 

 ce qu'il Importe surtout de faire ressortir ici — la Solution coioree exerce 

 toujours une action nuisible sur la vitalite des organismes : eile n'est toleree 

 qu'ä un etat de grande dilution et pendant peu de temps. 



Si, au contraire , on s'adresse a l'autre methode et qu'on se contente de 

 placer les elements vivants dans une Solution coioree quelque peu intense, 

 sans chercher a les colorer eux-memes, on s'expose aussi a amener leur mort, 

 seit par exosmose , soit meme le plus souvent par un empoisonnement veri- 

 table. 



II peut donc etre utile dans bien des cas de posseder un liquide forte- 

 ment colore qui ne soit pas toxique et n'exerce pas d'action osmotique sen- 

 sible sur les etres microscopiques que l'on y place. Pour satisi'aire a ces 

 conditions , il suffit de substituer aux Solutions colorees , de l'eau tenant en 

 Suspension des poudres colorees inSolubles. C'est a ce point de vue que je 

 voudrais appeler Fattention sur l'emploi de l'encre de Chine. Son innocuit^ 

 et sa coloration intense la rendent tres propre a l'usage dont je pai-le. 

 L'encre de Chine consiste, comme on sait, en noir de fumee et en matiere 

 gorameuse tres legerement aromatisee avec du musc ou du camphre. En la 

 delayant dans l'eau, on obtient un liquide du plus beau noir, gräce aux fines 

 particules de charbon qu'il tient en Suspension; mais ce liquide n'amene 

 point la Plasmolyse des cellules et les organismes continuent a y vivre par- 

 faitement. 



Voici comment on procede. On delaye un peu d'encre de Chine de bonne 

 qualite , mais pas trop parfum^e , dans un de ces godets de porcelaine qui 

 servent a l'aquarelle. 11 Importe de triturer soigneusement : le liquide doit 

 presenter au microscope des granules egaux et excessivement petits, animes 

 d'un vif niouvement brownien ; il doit avoir, en couche tres mince, une teinte 

 d'un gris fonce, mais non pas d'un noir opaque. On place une goutte de ce 

 liquide sur un poi'te-objet ; on depose sur un couvre-objet les organismes a 

 etudier et on l'applique sur la goutte de liquide noir, avec la face oü se 

 trouvent les organismes tournee vers le bas. De cette maniere, on evite qu'il 

 n'y ait des particules noires entre le verre couvreur et les objets a etudier. 

 Ceux-ci apparaissent remarquablement eclaires sur le fond grisnoir, de sorte 

 que leurs details s'aper9oivent avec nettete. La matiere charbonneuse ne 

 semble nuUenient incommoder les organismes microscopiques: ils s'y portent 

 tres bien et j'ai pu conserver ainsi des Spirogyres, des Vaucheries, des Infu- 

 soires etc. etc., vivants, pendant plusieurs jours. 



Pour des observations prolongees , il convient naturellement de se servir 

 d'une chambre humide ou d'empecher l'evaporation en pla^ant la preparation 

 dans une atmosphere saturee de vapeur d'eau. J'emploie d'ordinaire la 

 chambre humide de Ötras burger qui se compose d'un morceau de carton 

 humide , pose sur un porte-objet et perce en son centre d'une ouverture cii-- 

 culaire sur laquelle on applique un verre couvreur. Celui-ci porte a sa face 

 inferieure les organismes dans une goutte du liquide noir. 



On peut aussi faire dans l'encre de Chine des preparations durables. 

 Pour cela, on remplace peu a peu sous le couvre-objet, l'encre de Chine 

 delayee dans la glycerine. II faut toujours faire en sorte que le liquide noir 

 ne depasse pas les bords du cover, sans quoi il s'y produirait des courants 

 par suite de l'evaporation et les particules noires ne seraient plus uniforme- 

 tnent räparties. 



*) K. Brandt, Verhandl. d. physich Ges. Berlin. 1878. p. 85; et Biolog. 

 Centralbl. I. 1881. No. 7. — Certes, Comptes rendus. T. 92. No. 8 et Zool. 

 Anz. 1881. No. 81 et 84. 



