8] QUANTITATIVE CHROMATOGRAPHIE 121 



dieses Verfahrens auf Eluate mit einem Gehalt an nichtsublimierbarcn Salzen 

 aus lonenaustauschersäulen. Ammoniak und Ammoniumsalze werden im 

 Vakuum entfernt (s.o.). 



\>c 



Abb. 4. Auswaschen von Chromatographiepapier. 300 cm2 Schleicher-Schüll-Papier 

 2043 b wurden im Durchlaufverfahren mit Wasser, anschliessend (beginnend bei | ) mit 



5% Trichloressigsäure, schliesslich (beginnend bei 1 ) mit 5% methanolischer KOH 

 eluiert. Je 10 ml des Eluats wurden im Vakuum eingedampft und nach Ausäthern bzw. 

 Neutralisation die Ninhydrinbestimmung nach Moore und Stein durchgeführt, (a) Null- 

 wert der Reagentien; (b) unhydrolysiertes Eluat; (c) hydrolysiertes Eluat (24 Std., 110", 

 20% HCl). Die Extinktion bei 570 m/x von 1,0 entspricht 37,0 ng Alanin. 



ANWENDBARKEIT 



Das Verfahren hat Bedeutung für die Bestimmung der genauen Zahl 

 bestimmter Aminosäure- Reste'^'^ in gr<)ßeren Peptiden und in Proteinen. Es 

 ist geeignet, Verluste bei der Isolierung von Aminosäuren in biologischer 

 Material (z.B durch Hydrolyse, Enteiweissung, Entsalzung usw.) aus- 

 zuschalten. Man darf erwarten, daß mit seiner Hilfe die Genauigkeit von 

 Bestimmungen der Amino- und Carboxylendgruppen in Proteinen, die z.Zt. 

 mit Fehlern von teilweise 50% und mehr belastet sind^^ und umständlicher 

 (gelegentlich auch unsicherer) Korrekturen bedürfen, ähnlich gesteigert 

 werden kann, wie bei der Bestimmung von Aminosäuren in Hydrolysaten; 

 wir sind mit solchen Versuchen beschäftigt. 



