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(liaison 3 : tyrosyl-thréonine) correspond bien à la spécificité de la chymo- 

 trypsine. La seconde rupture est un peu plus surprenante puisqu'elle s'effectue 

 à coté d'un résidu d'asparagine pour lequel la chymotrypsine ne semble pas 

 avoir d'affinité particulière. Mais cette rupture est plus lente que la première. 

 Il est en outre intéressant de constater que la présence de sulfate d'ammonium 

 l'accélère beaucoup.* On sait que les ions calcium accélèrent également la 

 Proteolyse trypsique d'une liaison lysyl-isoleucine dans le trypsinogène et 

 qu'ils favorisent ainsi l'activation de ce zymogène.^^ L'influence exercée par 

 certains ions métalliques sur les phénomènes de protéolyse est bien connue. 

 Le fait nouveau est que cette influence puisse dans les deux examples pré- 

 cédents être localisée au niveau d'une liaison déterminée. Une telle spécificité 

 est-elle due à des interactions de l'ion avec le substrat, modifiant sa forme 

 ou attirant l'enzyme vers un point précis? L'ion agit-il au contraire sur 

 l'enzyme en modifiant son affinité et certains de ses propriétés? Des ex- 

 périences en cours au laboratoire permettront sans doute de répondre bien- 

 tôt à ces importantes questions. 



Le diagramme du bas de la fig. 4 est relatif aux peptides engendrés pendant 

 l'activation 'lente' du chymotrypsinogène. A première vue, ce diagramme 

 semble assez compliqué. Il est en fait aussi simple que le premier car les 

 deux pics centraux A et B correspondent, l'un à l'ammoniaquef et l'autre, 

 à un mélange de plusieurs peptides dont les proportions individuelles sont 

 très faibles. Nous n'avons donc à considérer que deux pics significatifs: le 

 pic de la sérylarginine qui montre que le principe de l'activation 'lente' est 

 le même que celui de l'activation 'rapide' et le pic de la thréonylasparagine, 

 qui montre que les proteolyses additionnelles de l'activitation 'lente' sont 

 dues à l'attaque chymotrypsique du chymotrypsinogène ou/et à l'autolyse 

 de la chymotrypsine-S, 



Le caractère mixte du processus de l'activation 'lente' apparaît ainsi en 

 toute clarté. Il comporte la rupture d'une liaison par la trypsine et la rup- 

 ture de trois liaisons (au maximum) par la chymotrypsine. Quand on coupe 

 successivement quatre liaisons dans un ordre quelconque, 2* = 16 possi- 

 bilités sont en principe offertes. La première correspond à l'état initial. Les 

 quinze autres sont trouvées en associant 1 par 1, 2 par 2, 3 par 3 et 4 par 4 

 les quatre ruptures envisagées. La fig. 6 donne un aperçu de ces quinze 

 possibihtés. 



Les quinze possibilités mentionnées dans la fig. 6 ne sont d'ailleurs à 

 considérer que si les quatre ruptures interviennent dans un ordre quel-conque. 



* Il est curieux de noter que Kunitz et Northrop ont obtenu la chymotrypsine- a parce- 

 qu'ils ont activé un cake de chymotrypsinogène contenant 50% de sulfate d'ammonium. 

 En activant du chymotrypsinogène dépourvu de sel, ils auraient principalement obtenu 

 une autre chymotrypsine de type a, la chymotrypsine-aj, contenant de la threonine en 

 position N-terminale. 



f Comme il vient d'être dit, l'activation 'lente' est réalisée en présence d'une quantité 

 très substantielle de sulfate d'ammonium. Les traitements classiques de dessalage n'arrivent 

 pas à éliminer la totalité des ions ammonium apportés par ce sel. 



