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lysine comme acide aminé C-terminal; on constate d'autre part que le peptide 

 TO. 10 correspond au même enchaînement que le peptide TO. 3 avec seule- 

 ment un résidu d'arginine supplémentaire, en position C-terminale. Enfin, 

 le peptide T0.9 est particulièrement intéressant: il se différencie de tous les 

 autres peptides obtenus par hydrolyse trypsique et dont la structure a été 

 établie, du fait que l'acide aminé qu'il possède en position C-terminale n'est 

 ni la lysine, ni l'arginine, mais la leucine. On verra plus loin que le peptide 

 T0.9 correspond à l'enchaînement C-terminal du lysozyme. 



REMARQUES 



1. Le peptide T0.5 mérite une mention particuhère; il ne contient en effet 

 aucun résidu d'acide aminé basique; sa production correspond donc à une 

 coupure aberrante, peut-être due à la présence d'un enzyme protéolytique 

 étranger dans l'échantillon de trypsine utilisé. De toute façon, le rendement 

 de ce peptide est très faible. 



2. La liste des peptides fournis par les tableaux 6 et 7 ne rend pas compte 

 de l'ensemble des résidus d'acides aminés du lysozyme; il manque notam- 

 ment les fragments de la protéine qui contiennent les résidus de tryptophane. 

 Il est intéressent à ce sujet de noter qu'il a été possible d'isoler sur papier, 

 après action de la trypsine sur le lysozyme non oxydé, un peptide dont la 

 structure est Val.Ala.Try.Arg. Ce peptide ne se retrouve pas après chromato- 

 graphic de l'hydrolysat trypsique sur colonne de Dowex 50 X 2; comme 

 probablement les autres peptides renfermant du tryptophane, il reste forte- 

 ment adsorbé sur la résine et ne pourrait être élue qu'en milieu très alcalin. 



HYDROLYSE DU LYSOZYME PAR LA PEPSINE 



Il paraît utile de donner ici les résultats d'une première étude des produits 

 résultant de l'action de la pepsine sur le lysozyme. ^^ Comme dans le cas de 

 l'hydrolyse trypsique, l'hydrolyse par la pepsine a porté d'une part sur le 

 lysozyme non oxydé, ici le lysozyme natif, et d'autre part sur le lysozyme 

 préalablement oxydé par l'acide performique. Dans les deux cas, la pepsine 

 exerce son action pendant 24 heures, à 37°, à pH 2,2, le rapport enzyme/sub- 

 strat étant de 1/100. Les premières séparations des produits formés sont 

 effectuées par chromatographic sur colonne de Dowex 50 x 2, comme 

 précédemment. Les détails de ces séparations et leur résultat sont indiqués 

 dans la fig. 3 pour le lysozyme natif et dans la fig. 4 pour le lysozyme oxydé. 

 Les fractions correspondant à un pic donné sont réunies, dessahfiées puis 

 soumises aux opérations habituelles de purification. On constate ainsi que 

 la plupart des pics renferment deux et quelques-uns même trois peptides 

 différents. La structure de quelques uns seulement des peptides ainsi obtenus a 

 été jusqu'ici établie : 



PA. 6 ou PO. 6 Val.Glu(NH2).Ala PA. 16 b Gly.Tyr. lieu. Leu 



PA. 7 ou PO. 7 Ileu.Thr.Ala PA. 17 ou PO. 17 Ala.Lys.Phe 



PA. 12 ou PO. 12 Gly.Ileu.Leu PA. 18c ou PO. 18c Tyr.Arg.Gly 



