VOL. 4 (1950) SYNTHESE D'AMIDON CHEZ UN FLAGELLE 273 



enzymatiques liberent du phosphate mineral. Les preparations n'ayant pu etre debarras- 

 sees des traces d'amylase, la synthase d'amidon n'a pu etre mise en evidence. Notons 

 aussi qu'il n'apparait pas de sucres reducteurs au cours de la liberation du P mineral. 

 II nous parait fort vraisemblable que Faction de la phosphorylase de Polytontella comme 

 celle des phosphorylases classiques etudiees par W. Kiessling', C. S. Hanes^ et par 

 C. F. CoRi, G. Schmidt et G. T. Cori^ est reversible. 



essai de purification de l'enzyme 



a) La preparation est traitee par le sulfate d'ammonium au tiers de saturation. Le 

 surnageant reste actif. Par contre, I'activite passe dans le culot apres precipitation par 

 le sulfate d'ammonium a demi-saturation. 



b) Si la preparation est centrifugee dans une centrifugeuse angulaire de Servall 

 a 12000 tours par minute pendant 10 minutes, la fraction active est dans le culot. 

 L'enzyme est lie a des granules qui sont visibles au microscope, mais que nous n'avons 

 pas identifies. 



Cette centrifugation elimine la plus grande partie d'une amylase que nous n'avons 

 cependant pas pu, meme apres centrifugations repetees, eliminer des granules contenant 

 la phosphorylase. D'autres essais de purification n'ont pas ete tentes. 



remarques sur l' amylase 



Les preparations d'amylase dans un tampon citrate M/20 ne donnent pas de sucre 

 reducteur en 2 h aux depens de I'amidon, mais uniquement des dextrines. Par contre, 

 les preparations maintenues 24 h sous toluene en 1' absence de phosphate mineral 

 montrent une legere activite reductrice. Le sucre, qui est vraisemblablement du maltose, 

 n'a pas ete identifie. On sait que le maltose n'est pas utilise par Polytontella coeca. Si done 

 la, ou les amylases intervenaient seules dans I'utilisation de I'amidon, leur action abouti- 

 rait a un glucide qui serait perdu pour les fiagelles en culture bacteriologiquement pure. 

 II est fort probable que I'amylase, ou des amylases, interviennent dans les premiers 

 stades de I'utilisation des grains d'amidon, et que les dextrines produites au debut de 

 I'attaque sont phosphorylees et donnent du glucose- i-phosphate avant que le stade 

 glucide reducteur ne soit atteint. 



discussion 



On connait jusqu'ici deux voies de biosynthese de I'amidon: par la phosphorylase 

 classique (C.Hanes,C.etG.Cori) et par I'amylomaltase (J.Monodet A.M.Torriani^"). 

 Ces deux enzymes representent d'ailleurs conformement aux idees exprimees par 

 DouDOROFF, Barker et Hassid^^ et par A. M. Torriani et J. Monod^^ jgg trans- 

 glucosidases. 



Le defaut de I'utilisation du maltose et des autres disaccharides permet d'exclure 

 I'hypothese d'une synthese de I'amidon chez Polytomella par une amylomaltase ou par 

 un enzyme du meme type. L'existence d'une phosphorylase suffit a rendre compte de la 

 synthese du polysaccharide. 



Admettons que cette phosphorylase soit responsable de la synthese de I'amidon 

 chez le flagelle. Deux questions restent posees. 

 Bibliographic -b. 2']4\2'j$. 

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