VOL. 4 (1950) COMPLEXES ENZYME-SUBSTRAT, ANTIGENE-ANTICORPS 239" 



s'agit de la peroxydase et du peroxyde d'hydrogene dont I'union donne un compose 

 caracterise par son spectre d'absorption. Malheureusement la variation de la constante 

 avec la temperature n'a pas ete determinee, si bien que meme dans ce cas on n'a 

 pas encore I'enthalpie. La technique employee par Chance est d'ailleurs restreinte 

 aux associations enzyme-substrat qui ont un spectre d'absorption caracteristique. 



Une autre technique, applicable specialement aux associations des enzymes avec de 

 grosses molecules, pent etre fondee sur une autre propriete. On salt mesurer, en principe,. 

 les poids moleculaires a partir de I'intensite de la lumiere diffusee et tirer des indications 

 sur les dimensions des molecules a partir de la distribution angulaire de cette intensitc. 

 Cette technique, actuellement mise en oeuvre dans notre laboratoire, pourra etre appli- 

 quee aux complexes formes entre les enz5mies proteolytiques et leur substrat. 



II. L'UNION DE l'aGGLUTININE AUX HEMATIES 



I. Equilihre de V agglutination 



Pour un autre type de complexes proteiques dissociables, celui forme par un anti- 

 gene avec un anticorps, une mesure directe de la chaleur degagee a ete effectuee par 

 Boyd et ses collaborateurs^. Ces auteurs ont trouve que la combinaison de I'hemocyanine 

 avec son anticorps chez le cheval, degage 40000 calories par molecule d'antihemocyanine. 



On a depuis Arrhenius cherche a obtenir la chaleur de reaction a partir de I'effet 

 de la temperature sur I'equilibre qui s'etablit entre antigenes et anticorps. La difhculte 

 est d'expliciter la relation qui unit les constantes d'equilibre a la composition du com- 

 plexe forme. En particulier, les resultats dependent de I'idee que Ton se fait de la struc- 

 ture de ce complexe, de la valence des constituants, et des interactions entre les groupes 

 reactifs d'une meme molecule. 



Nous avons pense que le procede statistique le plus simple pouvait etre applique 

 k I'isohemagglutination. Celle-ci etant une reaction de surface, on devait etre a meme de 

 calculer, avec un minimum d'hypotheses, la relation existant entre la grandeur observee 

 et une constante d'equilibre. Ce phenomene presentait en outre I'avantage que sa 

 reversibilite avait ete tres surement prouvee. 



Soit T le taux d'a ;glutination, c'est-a-dire, en appelant Nj le nombre d'hematies 

 libres, le rapport entre le nombre des hematies agglutinees (N^ — Nj) et le nombre total 

 d'hematies N^. Filitti-Wurmser et Jacquot-Armand^ ont etabli que, par numeration 

 dans un hematimetre, I'erreur standard sur le taux d'agglutination varie entre 0.3% 

 pour T = 0.99 et 7% pour r = 0.45. La technique est done utihsable pour une etude 

 quantitative. Elle a servi a demontrer la reversibilite de I'agglutination par les faits 

 suivants. 



a) Dissociation de I'agglutinat. On obtient le meme etat d'equilibre quand on agglu- 

 tine des hematies ou quand on dissocie un agglutinat. 



Pour le prouver on melange dans une premiere operation un serum avec un nombre 

 donne d'hematies et une solution tampon de maniere a avoir un volume V. On obtient 

 un certain taux d'agglutination. Dans une deuxieme operation on melange le meme 

 serum avec le meme nombre d'hematies et une quantite de solution tampon telle que 

 le volume v est plus petit que V. II se forme un agglutinat plus abondant. Lorsque celui-ci 

 a atteint son equilibre, on dilue jusqu'au volume V. Le nouveau taux d'agglutination 

 qui s'etablit est egal a celui obtenu dans la premiere operation. 

 Bibliographie p. 243. 



