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giorni alla temperatura di 37° C. sui terreni impregnati «li tetano- 

 toxina, e poscia dalla superfìcie del tubo U non un ago di platino 

 ad ansa si prenda un po' della patina costituita dal microrganismo 

 e la si inoculi nel connettivo sottocutaneo di una cavia, questa muore 

 con sintomi tetanici in 12, 14 a 10 ore. In questo caso la morte così 

 rapida dell' animale e dovuta al prodotto del bacillo del tetano as- 

 sociato al prodotto di uno de' microrganismo su nominati. Se però 

 dai tubi ad U, contemporaneamente alle inoculazioni in animali, si 

 facciano passaggi di ciascun microrganismo in altri tubi con agar 

 sterile, che si tengono in istufa a 37° C. per 2 a 3 giorni, e poscia 

 colla patina cresciuta superficialmente in ciascuno di questi tubi al 

 2° passaggio si inoculi una cavia, 1' animale muore in breve tempo, 

 dopo 14 a 16 ore, di tossicoemia con sintomi tetanici. Se si inocu- 

 lano i bacilli del terzo passaggio 1' animale muore pure cogli stessi 

 sintomi, dopo 16, 18 e 20 ore. Inoculando la patina del 4° , 5° , 6°, 

 7°, 8°, 9°, ed in alcuni casi anche del 10° passaggio , si continua 

 sempre ad avere la morte dell' animale; ma dopo il 4° o il 5° pas- 

 saggio la morte non accade più fra le 16, 18 e le 20 ore: ma inve- 

 ce, pur conservando gli stessi sintomi , avviene dopo 36, 40 a 48 

 ore dopo l'inoculazione. I microrganismi su nominati si spogliaro- 

 no interamente del rivestimento di tetanotoxina dopo il 9° passaggio. 



Ogni volta che si facevano le colture in agar si facevano pure 

 in gelatina; ed in queste si è potuto osservare che tanto i fiuidifì- 

 catori quanto i cromogeni avevano conservato tanto il potere di pro- 

 ti arre il fermento fluidificante la gelatina, quanto quello di produrre 

 pigmento. Un' avvertenza è mestieri si faccia, ed è : che tutte le 

 volte che si fa il passaggio del microrganismo che ha vegetato col 

 tetano, cioè che si trasporti dalla tetanotoxina su agar comune, bi- 

 sogna aver cura di non prender mai i microrganismi dalla infissione, 

 ma sempre dalla superfìcie ; e ciò per evitare il trasporto di qualche 

 bacillo del tetano che avrà potuto avere oltrepassato il limite, costi- 

 tuito dalla bambagia, che separa 1' una branca dall' altra del tubo 

 ad U, fatto che è avvenuto quando il tampone centrale di ovatta non 

 era stato messo con cura, e non sii era stata data quella spessezza 

 necessaria. Anche nei successivi passaggi da tubo a tubo è bene si 

 prendano sempre i microrganismi dalla superficie. I passaggi si fac- 

 ciano dopo il 3* o il 4° giorno che il tubo è stato tenuto nel termo- 

 stato a 37° C. 



Se uno de' sei microrganismi su nominati, dopo che abbia ve- 

 getato, come si è detto, per 15 a 20 giorni su agar impregnato di 

 tetanotoxina, e poscia, mercè passaggio ogni tre o quattro giorni, 

 se ne sia spogliato intieramente, si inoculi nel connettivo sottocu- 



