2. Fixirung für Schnittserien. \ 7 



Äther, Celloidin(!) stets durch Zusatz von Kupfersulfat den Nachweis zu erbringen, dass sie 

 vollkommen wasserfrei sind. 



Mit gutem Erfolg wandte ich auch folgende etwas modificirte Celloidin-Paraffinein- 

 bettung, die mir Herr Prof. v. Apathy demonstrirte, an: Unter einem Schwefelsäureexsiccator 

 kommen die Thiere von abs. Alkohol über Äther in 2procentiges Celloidin. wie bei voriger 

 Methode. Man fertigt dann einen viereckigen Paraffinrahmen (von Vi — 1 c™ Höhe) auf einer 

 Glasscheibe an, füllt ihn mit 4procentigem, entwässertem Celloidin aus, überträgt die 

 Thiere in das Celloidin und härtet, nach Orientirung der Objecto, zunächst in Chloroform- 

 dämpfen, sodann in Chloroform selbst. Ist das Celloidin genügend gehärtet, so schneidet man 

 die einzelnen Objecto mit einem Scalpell in AYürfelform aus, lässt sie noch einen Tag, 

 zum wenigsten einige Stunden im Chloroform und überträgt sie dann (über Benzol oder direct) 

 in Paraffin. Aus dem Paraffin, in dem die Objecto einige Stunden oder länger bleiben, nimmt 

 man die Celloidinblöcke mittelst Pincette heraus und setzt sie auf eine mit Glycerin schwach 

 bestrichene Glasplatte, und zwar so, dass die Seite des Blocks, der das Object am nächsten 

 liegt, auf die Glasplatte zu liegen kommt. Im übrigen geschieht die Zerlegung in Schnitte 

 wie nach Paraffineinbettungen. 



Bei dieser Celloidin-Paraffin-Einbettung werden die Gewebe, besonders das Mesenchym, 

 in natürlicher Ausdehnung erhalten, welcher Vortheil Objecten gegenüber, die einfach vom 

 abs. Alkohol über Benzol oder Xylol in Paraffin übergeführt wurden, an Schnittpräparaten 

 unverkennbar ist. Einfache Xylol- Paraffin-Einbettungen rufen meist derartige Schrumpfungen 

 hervor, dass die Objecte im Vergleich zu denen nach den Celloidin-Paraffinmethoden be- 

 handelten Objecten geradezu als Macerationspräparate erscheinen. 



Die Schneidetechnik wird durch die Celloidin-Paraffin-Einbettung in keiner Weise er- 

 schwert. Die Schnitte Hessen sich abwärts bis zu einer Dicke von 2 (j. anfertigen, doch zer- 

 legte ich die Objekte meist in 5 und 10 'jl dicke Schnitte. Zum Aufldeben der Schnitte diente 

 Eiweissglycerin und AVasser. 



Schnittfärbung. Ich wandte hauptsächlich die Heidenhain sehe Hämatoxylinfärbung, 

 Hämalaun (Mater) und Hämatein I-A (Apathy) an. alle drei Färbungen meist in Verbindung 

 mit Orange-G. 



Nach Heidenhain färbte ich die Schnitte, die in 2,5 procentigem Eisenalaun (etwa 

 15 Minuten) vorbehandelt wurden, 10 — 20 Minuten in 0,5 procentigem Hämatoxylin, diff'eren- 

 cirte nach Bedürfniss in Eisenalaun, wusch sie kurz in destillirtem und Leitungswasser, brachte 

 sie dann auf kurze Zeit in Ammoniakalkohol, führte sie über 35 procentigen Alkohol in dest. 

 Wasser zurück und färbte sie einige Minuten in Orange-G. Sodann spülte ich sie kurz in 

 dest. Wasser und 3 5 procentigem Alkohol ab und führte sie über Ammoniakalkoholjn 90 pro- 

 centigen Alkohol, absoluten Alkohol und Xylol über. 



In Hämalaun (MayerI und Hämatein I-A (Apathy) färbte ich die Schnitte nach Bedürfnis 

 (10 Minuten und mehr), spülte sie in destillirtem und Eeitungswasser ab, difi"erencirte, nament- 

 lich bei Überfärbung, in schwach salzsaurem Alkohol (70 Procent) und führte sie über Ammoniak- 



Zool. Station zu Seapel, Fanna nnil Flora, Golf Ton Neapel. Tricladen. 3 



