DIFFÉRENCIATIONS CYTOPLASMIQUES DANS LES VÉGÉTAUX 385 



Les ovaires avaient été coupés en tronçons de 5 mm. environ et étaient 

 conservés depuis assez longtemps (un an environ) dans l'alcool à 8o°. C'est 

 ce mode de fixation qui nous a donné les plus belles structures ergasto- 

 plasmiques; par contre, jamais nous n'avons pu obtenir, parce procédé, les 

 aspects nettement - mitochondriaux - que montrèrent les réactifs dont nous 

 allons maintenant parler. 



B. Méthodes spéciales (mitochondriales). — Sous cette rubrique nous 

 rangeons les divers modes de fixation qui permettent la conservation et la 

 coloration des chondriosomes. Mais ici, si l'on veut, à la lumière des mé- 

 thodes employées, examiner la valeur des résultats obtenus, il ne suffit pas 

 d'énumérer les mélanges utilisés; il faut absolument décrire avec précision 

 les diverses précautions à prendre pour arriver à de bons résultats; nous 

 avons pu constater, en effet, que pour bien conserver les éléments mitochon- 

 driaux, la - manière « de fixer importe autant et plus peut-être que le choix 

 des liquides fixateurs. Voici tout de suite un exemple de ce que nous vou- 

 lons dire : plusieurs auteurs mettent sur le compte de l'acide acétique la 

 production des structures ergastoplasmiques; or, nous verrons que la liqueur 

 chromo-osmique, sans la moindre trace d'acide acétique, peut, dans cer- 

 taines conditions, livrer à l'observation de belles figures ergastoplasmiques. 



a) Nous avons d'abord employé le mélange fort de Flemming, mais 

 avec une proportion très faible d'acide acétique selon la formule de Meves- 

 Duesberg (08) ; assez souvent même nous l'avons utilisée sans aucune trace 

 d'acide acétique comme l'a fait récemment Forenbacher (12). Les ovaires 

 coupés en tronçons d'environ 2 mm de longueur furent plongés dans des 

 mélanges très Irais et y restèrent un minimun de 3 jours, très souvent 6 à 

 8 jours. La meilleure durée parait être de 6 jours. 



b) Nous avons utilisé en même temps la méthode IV de Regaud (10) 

 préconisée par ce savant, pour l'étude des mitochondries et déjà appliquée 

 aux végétaux par plusieurs auteurs (Guilliermond, Pensa, etc.). Nous 

 avons d'abord employé la variante indiquée par l'auteur lui-même : 6 jours 

 dans un mélange de 20 % de formol commercial et 80 % d'une solution de 

 bichromate de K à j "/o- en ayant soin de renouveler le réactif tous les jours. 

 Cette fixation, excellente pour les autres cellules de l'ovaire, contracte beau- 

 coup trop le sac embryonnaire; nous avons réussi à diminuer cette contrac- 

 tion en fixant, pendant une durée de 6 à 12 heures, par le formol seul 

 (solution aqueuse à 20 "/„ «le formol commercial) avant d'employer le mé- 

 lange formol-bichromate. Parfois même nous nous sommes contenté de la 

 simple fixation au formol concentré (40 ° ) pendant 2 à 3 jours. 



