DIFFÉRENCIATIONS CYTOPLASMIQUES DANS LES VÉGÉTAUX 3&7 



et leur transformation problable en structures ergastoplasmiques ('). Les 

 objets fixés simplement pendant 12 ou 24 heures au Flemming faible, sans 

 post-chromisation, montrent toujours au contraire l'ergastoplasme bien con- 

 stitué. 



d) Enfin la meilleure fixation pour l'étude des mitochondries nous 

 parait être la suivante : 



2 à 3 jours dans le mélange chromo-osmique selon la formule de 

 Meves-Duesberg (un séjour plus prolongé amène la dissociation des cel- 

 lules) ; ensuite 4 jours ou plus dans le formol-bichromate. De la sorte, les 

 tissus sont bien conservés, les cellules ne subissent aucune contraction et 

 le chondriome se colore très bien, soit à l'hématoxyline ferrique, soit au 

 crystall-violett. Après ces fixations de longue durée, surtout après l'emploi 

 du bichromate de K, un lavage de 24 heures à l'eau courante est nécessaire ; 

 sinon, comme l'a fait remarquer Duesberg, les objets se coupent très mal 

 au microtome. 



Au sujet de ces diverses méthodes, nous insistons encore sur deux 

 points : d'abord il faut employer des liqueurs fixatrices toutes fraîches qui 

 n'aient pas eu le temps de subir d altération dans leur composition par 

 suite de réactions chimiques lentes; ensuite il faut enrober les objets le 

 plus tôt possible après la fixation ; nous avons des raisons de penser avec 

 Fischer (99) que, du moins dans certains cas, le séjour prolongé dans les 

 alcools peut modifier les structures protoplasmiques. 



Coloration 



a) Après les méthodes ordinaires ^Flemming et Bouin, 1-2 jours) 

 nous avons coloré presqu'exclusivement à l'hématoxyline ferrique. 



Pour colorer le fond du cytoplasme, nous avons très souvent essayé le 

 rouge Congo, qui prend très difficilement d'ailleurs. 



b) Après fixation selon la méthode IV de Regaud, nous avons mor- 

 dancé à chaud dans une solution d'alun concentrée (5-7 %) et coloré par une 

 hématoxyline préparée selon la formule du même auteur. 



c) Après fixation au mélange de Flemming avec très peu ou sans 

 acide acétique, suivie ou non de l'action d'autres réactifs, nous avons em- 

 ployé, soit la coloration au crystall-violett suivant la méthode de Benda 

 modifiée (cf. Meves-Duesberg), soit la coloration à l'hématoxyline ferri- 

 que; les préparations au crystall-violett mettent mieux en relief les forma- 



1 Xous préciserons plus loin notre pensée au sujet de la relation entre les deux structures. 



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