DU DEVELOPPEMENT DE LŒUF ET DE LA FECONDATION 9 



doit pas dépasser pour les clepsines une minute et demie à deux minutes. 

 Pour le Tiibifex, il est indispensable de réduire à son minimum le séjour 

 dans la paraffine pure; nous ne faisons que les transporter du mélange de 

 chloroforme et de paraffine dans la paraffine pure et nous refroidissons 

 instantanément dans l'eau. Il faut noter, en effet, que dans la méthode au 

 chloroforme, la chaleur rend très vite les œufs des Tubifex durs et cassants. 

 2) Nous avons remplacé le chloroforme par la térébenthine pour les 

 gros œufs des clepsines et les œufs pondus des Tubifex. Les œufs des clep- 

 sines, une fois qu'ils sont chargés d'enclaves, deviennent tellement durs 

 par l'enrobage au chloroforme, qu'il est absolument impossible de les cou- 

 per. Il n'en est pas de même des gros œufs des Tubifex, à condition de 

 réduire à son minimum le séjour dans la paraffine pure; mais les œufs 

 pondus étant assez difficiles à manier à cause de leur petitesse, ce séjour 

 devient facilement trop long et les œufs deviennent cassants. La méthode 

 à la térébenthine est donc préférable ; elle donne d'ailleurs d'aussi bons ré- 

 sultats que la méthode au chloroforme. Dans la méthode à la térébenthine, 

 nous laissions les œufs cinq minutes dans l'alcool à 95°, deux à trois minutes 

 dans l'alcool absolu, cinq minutes dans un mélange à volumes égaux d'alcool 

 absolu et de térébenthine, cinq minutes dans la térébenthine pure, une heure 

 dans le mélange de térébenthine et de paraffine et deux à trois minutes dans 

 la paraffine pure. Le séjour un peu plus prolongé, par ex. cinq à six heures, 

 dans le mélange de térébenthine et de paraffine, sur la couveuse, suffit aussi 

 pour rendre les œufs cassants. 



Coloration. 



Nous avons toujours coloré sur le slide. Nous avons habituellement 

 employé Ihématoxyline diluée de Delafield; nous laissions les coupes de 

 deux à quatre heures dans ce colorant, suivant la concentration, et nous 

 surveillions les préparations au microscope. 



L'hématoxyline au fer d'HEiDENHAiN nous a aussi donné de très bons 

 résultats. Les coupes séjournent pendant vingt-quatre heures dans l'alun 

 de fer à 2 1/2 0/0, qui sert de mordant; puis, après un lavage à l'eau de 

 quelques instants, elles passent vingt-quatre heures dans l'hématoxyline à 

 2 1/2 pour lono. On décolore ensuite, dans le mordant, sous le microscope 

 et on lave un quart d'heure à l'eau après la décoloration. Suivant une mo- 

 dification introduite par Janssens, on peut très bien réduire à dix minutes 

 le séjour dans l'alun de fer et dans l'hématoxyline, à condition de colorer 



