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pour permettre une pénétration rapide. Les individus dont le péritoine 

 était rempli d'œufs étaient plongés le ventre ouvert dans la solution, où les 

 œufs tombaient bientôt sous l'action de la pesanteur. Le temps de la fixation 

 ne dépassait jamais 20 à 30 minutes. 



Les œufs situés dans les oviductes réclamaient plus de temps et plus 

 de soins; il fallait percer la capsule extérieure des enveloppes ovulaires pour 

 faciliter la pénétration de la liqueur. Celle-ci s'opère rapidement, d'ailleurs, 

 grâce à l'absorption énorme- d'eau par les enveloppes muqueuses. Si l'on 

 prolonge l'action de la solution, ces dernières se dissolvent entièrement, 

 mais alors les œufs deviennent cassants et la nucléine s'altère à la longue. 

 Aussi préférons-nous faire sortir les œufs par la pression, comme nous l'avons 

 indiqué pour les tritons. Nous lavions à grande eau, et nous durcissions 

 lentement, sans toutefois dépasser l'alcool à 80". 



Colorations. 



Nous avons employé les colorations les plus variées; nous en avons 

 mentionné quelques-unes dans notre premier mémoire (1); nous n'avons à 

 ajouter ici que deux méthodes applicables dans le cas très spécial de la 

 recherche des figures cinétiques au milieu des enclaves et du pigment qui 

 est très abondant chez quatre des espèces que nous avons étudiées. Chez 

 les crapauds surtout, le pigment est tellement massé au pôle, la figure est 

 tellement petite, qu'il a fallu nécessairement user d'artifices pour reconnaître 

 les chromosomes au milieu des enclaves. Or, comme chacun sait, les en- 

 claves ont une affinité aussi grande que la nucléine pour les colorants 

 nucléaires les plus électifs; la grande difficulté à vaincre est de colorer les 

 chromosomes et les enclaves de manière différente. 



Après de longs essais, nous nous sommes arrêtés aux méthodes sui- 

 vantes, qui nous ont donné des résultats satisfaisants. 



Les œufs étaient débités en coupes d'une épaisseur de 5 |a maximum, 

 par séries de 125 à 150 suivant le volume, et fixés sur porte-objets; puis, 

 usant d'un faible objectif, nous recherchions rapidement le pôle supérieur 

 et la tache blanchâtre, dans laquelle la figure doit se trouver. Nous jetons 

 les coupes superflues et portons la préparation pendant 4 ou 5 minutes dans 

 une solution forte de bleu carmin acidulé d'acide acétique, puis dans une 

 solution de safranine (1 gr. pour cent alcool à 50°;; les coupes séjournaient 



(i) J. B. Caknoy et H. Lebkun : La i'csic}ilc' gcnniiiatiye cl les gluhulcs yoljircs des B^ilra- 

 cicns; La Cellule, t. XII, 1S97. 



