LA VESICULE DES BATRACIENS 209 



dans cette solution pendant deux heures au minimum ; nous décolorons 

 lentement dans l'alcool à 80°. Pour obtenir une différentiation convenable, 

 il faut que les enclaves soient colorées en vert bleuâtre, le cytoplasme en 

 rose; on reconnaîtra alors facilement les chromosomes et le fuseau, qui sont 

 colorés plus intensément que le réseau du cytoplasme. Si la décoloration est 

 trop prolongée, tout se décolore rapidement, car la durée d'action de la 

 safranine a été trop courte pour obtenir une différentiation de la nucléine. 

 D'autre part, on ne peut prolonger cette durée, car après deux heures la 

 safranine se substitue entièrement au bleu carmin. 



Pour obtenir une double coloration sur les œufs contenant des fi- 

 gures cinétiques, sans avoir besoin de les débiter en coupes, nous avons 

 essayé différentes colorations in toto. Ce qui nous a le mieux réussi est 

 un mélange de bleu carmin et d'hématoxyline de Delafield. Il faut em- 

 ployer des solutions extrêmement diluées, 2-3 gouttes d'hématoxyline, 

 2 gouttes de bleu carmin pour 25 à 30 c' d'eau distillée. Quand la propor- 

 tion de bleu carmin est trop forte, l'hématoxyline se précipite; il faut alors 

 préparer une nouvelle solution, sinon on obtient une coloration uniformé- 

 ment verte. Quand l'hématoxyline reste en proportion suffisante, on obtient 

 une coloration bleu violet des chromosomes, tandis que les enclaves et 

 le cytoplasme présentent une teinte vert d'eau uniforme, sui' laquelle les 

 chromosomes et le fuseau tranchent fortement. Le pigment noir qui remplit 

 le pôle supérieur de l'œuf masque parfois tellement les figures cinétiques, 

 chez le Biifo vulgavis par exemple, qu'il est souvent indispensable de les 

 dépigmenter. 



Nous avons institué à cet effet des essais nombreux avec l'eau oxygénée, 

 l'eau de chlore, l'eau de brome. C'est ce dernier réactif qui nous a donné 

 les résultats les plus rapides et les meilleurs. On doit seulement le faire 

 agir sur des coupes minces. La dépigmentation de l'œuf in toto n'est pas 

 praticable, car la pénétration est trop lente, pour pouvoir attendre, sans 

 préjudice, que le réactif ait atteint la plage de la figure polaire. En effet, 

 après une action de 5 ou 6 heures, l'eau de brome attaque fortement les 

 chromosomes et leur enlève toute électivité. Sur des coupes minces au 

 contraire, l'action est plus rapide et plus générale. Nous ne sommes jamais 

 parvenus à décolorer complètement les granules pigmentaires sans altérer 

 gravement la structure du protoplasme et des chromosomes; c'est pourquoi 

 nous arrêtons la décoloration quand ces granules ont pris une teinte bru- 

 nâtre, suffisamment pâle pour qu'on puisse reconnaître le fuseau. 



