2G2 René de LITARDIÉRE 



MiNG, modifié selon la formule de Benda-Meves (1), liquide qui m'a tou- 

 jours donné d'excellents résultats. Par comparaison, je me suis servi parfois 

 des solutions forte et faible de Flemming, du picroformol de Bouin et de 

 l'alcool-acétique; mais je les ai abandonnés, sauf dans des cas exceptionnels, 

 ainsi que la -^ médium chromo-acelic solution « de Chamberlain, que j'avais 

 utilisée au début de mes recherches. 



Le fixateur de Benda, dont l'usage est encore bien peu répandu, ne 

 saurait vraiment être trop recommandé pour l'étude des structures chromo- 

 somiques. Par suite de la très faible quantité d'acide acétique qui entre dans 

 sa composition, il conserve parfaitement la structure des chromosomes, sans 

 en amener le gonflement propre aux liquides contenant une quantité 

 notable de cette substance. Pour les objets de petit calibre, comme sont, en 

 général, presque toutes les racines de Fougères, ce fixateur permet aussi 

 bien l'étude des noyaux centraux que périphériques. 



La durée de fixation a été de 48 heures. Elle a cependant été réduite 

 avec succès à 14 heures, et même 7 heures, pour les très petites racines 

 d'A^olla et de Pilularia. 



Après la fixation, les objets ont été lavés 2 heures au maximum à l'eau 

 courante. 



La déshydratation a été faite suivant la méthodehabituelle. J'ai toutefois 

 abrégé le temps d'immersion dans les alcools, sauf dans l'alcool à 80° où 

 les objets restaient souvent de deux à trois jours (2) ; dans les alcools faibles 

 ils étaient laissés une heure, une demi-heure dans l'alcool à g5°, une demi- 

 heure également dans l'alcool absolu, dans le mélange d'alcool absolu et de 

 chloroforme le temps nécessaire pour qu'ils tombent au fond du récipient, 

 en général de cinq à dix minutes, parfois seulement une ou deux minutes, 

 puis le même laps de temps dans le chloroforme pur. 



Mis dans un mélange à parties égales de chloroforme et de paraffine à 

 52°, les matériaux ont été placés pendant cinq heures dans l'étuvc à 35° en 

 godets couverts; puis, de là, transportés à l'étuve à 55° dans de la paraffine 

 pure, où je les ai laissés seulement dix minutes. Un long séjour dans 



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(i) Solution d'acide chromique à i o/o 45cc 



Solution d'acide osmique à 2 "/o 12== 



Acide acétique cristallisable VI gttes. 



(2) ]'ai dû, pendant la guerre, laisser séjourner des racines plus d'un an et demi dans l'alcool 

 A. 80°; il n'en est résulté aucune altération de structure, ni aucune défectuosité en ce qui concerne la 

 coloration. • 



