308 ANNALES DE L'INSTITUT PASTEUU 



(lu contenu intestinal au moyen d'un fil de platine, et faire un 

 isolement sur gélose inclinée, ou, si l'on préfère, en boîte de 

 Pétri. Cultiver à la température de la chambre. Après vingt- 

 quatre, Irente-six heures, les colonies sont suffisamment déve- 

 loppées pour pouvoir être soit repiquées sur gélose, si Ion 

 veut simplement conserver le virus, soit ensemencées directe- 

 ment en bouillon qui servira aux infestations. 



Ensemencements des bouillons. — Le bactériologiste devra 

 toujours avoir présent à la mémoire que la virulence du 

 coccobacille baisse très rapidement en culture, et s'atténue 

 également d'une façon très sensible j)ar repiquage ; pour ces 

 raisons, il est absolument indispensable d'ensemencer les bouil- 

 lons destinés aux infestations avec un coccobacille : 



1" Qui a' subi le moins de repiquages possibles. Ce résultat 

 est obtenu en prélevant la semence directement sur les tubes 

 ayant servi à faire l'isolement, ou sur les boites de Pétri, si on 

 a choisi ce moyen pratique, vu les conditions où on est appelé 

 à opérer ; 



2° Qui vient de sortir de l'organisme de la sauterelle. 

 Comme la campagne d'infestation peut durer plusieurs mois, 

 si les régions envahies sont étendues, il faut continuer la série 

 des passages pendant toute la durée de la campagne, de 

 manière à avoir toujours sous la main un virus au maximum 

 d'exaltation et ne pas être forcé d'employer une semence 

 depuis plusieurs jours en culture. 



J'indiquerai plus loin une autre méthode d'obtention d'un 

 virus exalté au cours d'une campagne. 



Je recommande tout spécialement aux bactériologistes 

 chargés des infestations de ne jamais commencer avec un 

 coccobacille insuffisamment exalté; il vaut mieux se donner la 

 peine de faire deux ou trois passages de trop que de n'en 

 pas l'aire assez; dans le premier cas, ce n'est qu'un retard de 

 un ou deux jours; dans le second, c'est le résultat de toute une 

 campagne qui peut se trouver compromis. 



Il est inutile de dire que les bouteilles de bouillon devront 

 être ensemencées purement, ce qui n'est pas facile avec 

 des récipients munis de fermeture mécanique ; on y arrive 

 pourtant avec un peu de pratique. Quand on ouvre la bouteille 

 pour faire les pulvérisations, on reconnaît de suite si la culture 



