842 ANNALES DE LINSTITUT PASTEUR 



61 Proteus que j'avais à ma disposition. Pour chacun de ces 

 échantillons d'origines si diverses, j'ai fait plusieurs séries 

 d'essais en employant des cultures en eau peptonée ou sur 

 gélose ordinaire. L'eau peptonée était une solution à 20 p. 1000 

 de peptone pancréatique Defresne; la gélose était préparée avec 

 un mélange à parties égales de bouillon de viande non peptoné 

 et de peptone Martin. 



Les préparations étaient faites avec des cultures ajant 7, 24 ou 48 lieures 

 de séjour à 37 degrés et établies en six exemplaires pour chaque série. Après 

 dessiccation spontanée, deux d'entre elles étaient fixées par la chaleur à la 

 manière ordinaire; deux autres étaient fixées par immersion dans une solu- 

 tion aqueuse saturée de sublimé, contenant IJ p. 1000 d'acide acétique, lavées 

 à l'alcool et séchées à 37 degrés ; enfin les deux dernières étaient arrosées 

 avec un mélange à parties égales d'alcool absolu et d'éther que je laissais 

 s'évaporer sans faire intervenir la chaleur. Ces préparations diversement 

 fixées étaient traitées, les unes suivant l'ancienne technique — violet de gen- 

 tiane aniline fraîchement préparé, solution iodo-iodurée à 1 p. 300 diode, 

 alcool absolu — les autres par la méthode généralement employée aujour- 

 d'hui — violet de gentiane phéniqué, solution iodo-iodurée au 1/300, décolo- 

 ration par le mélange de Nicolle : alcool absolu 5 volumes, acétone, 1 volume. 

 Toutes étaient alors immergées quelques instants dans la fuchsine de Ziehl 

 diluée au 1/10 pour recolorer les éléments microbiens devenus inco- 

 lores. 



Déplus, je n'ai jamais employé de liqueur iodo-iodurée vieille 

 de plus de quinze jours et j'ai toujours pris soin de faire une 

 décoloration aussi ménagée que possible. Chaque fois que j'ai 

 utilisé l'alcool-acétone. j'ai suivi scrupuleusement les indica- 

 tions données par MM. Nicolle et Remlinger dans leur Précis; 

 de Technique Microbiologiqxe. Je me suis donc placé dans des 

 conditions très variées, mais, malgré cela, parmi les nombreuses 

 races de Proteus que j'ai examinées, je n'en ai pas trouvé une 

 seule qui ait pris le Gram. 



Cependant je n'ai pas voulu me contenter de ce résultat et 

 i'ai l'ait encore quelques essais en utilisant des milieux qui me 

 semblaient capables d'influencer quelque peu les affinités colo- 

 rantes des Proteus cultivés sur eux. Des cultures sur lait et sur 

 deux milieux contenant de l'oléate de Na m'ont permis d'ob- 

 server, dans des préparations traitées par l'ancienne technique, 

 des éléments plus ou moins nombreux encore colorés en violet 

 avec une proportion variable de microbes d'aspect granuleux; 

 mais les Proteus provenant des mêmes cultures se sont toujours 



