920 ANNALES DE L'INSTITUT PASTEUR 



Toutefois, j'ai substitué à la gélose, viande, pomme de terre, 

 préconisée par M. Nicolle, un milieu plus économique dont 

 le procédé de préparation est basé sur la méthode générale que 

 j'ai publiée il y a trois ans(l). 



Voici d'ailleurs la technique que j'ai adoptée : 



Deux kilogrammes de viande de cheval hachée, bien maigre, étaient placés 

 dans une marmite émaillée et mis en suspension dans la solution suivante : 



Eau bouillante 5 litres. 



Lessive de soude chimiquement pure à 36 Baume . . 135 cent, cubes. 



Le tout était porté à l'autoclave et maintenu à 134 degrés pendant une 

 heure et demie. Aussitôt le mélange sorti de l'autoclave, je lacidifiais très 

 légèremPTit avec de l'acide chlorhydrique chimiquement pur, puis je l'aban- 

 donnais jusqu'au lendemain. Je le passais alors sur un tamis de crin, de 

 façon à séparer les débris de tendons et d'aponévroses ainsi que de petites 

 masses d'acides gras; j'avais ainsi une solution renfermant tous les pro- 

 tciques de la viande à l'état de deutéroprotéoses, c'est-à-dire au stade de 

 désintégration de la molécule albuminoïde le plus rapproché des peptones 

 de Kiihne. 



.J'ajoutais à ces cinq litres de solution le même volume d'une bouillie très 

 lluide, passée au tamis, obtenue en délayant dans cinq litres d'eau 2 kilo- 

 grammes de pommes de terre pelées, découpées en petits fragments et 

 cuites 30 minutes à l'autoclave à 120 degrés. 



Je neutralisais ce mélange, qui contenait alors une proportion de chlorure 

 de sodium voisine de la teneur habituelle des milieux de culture, puis j'y 

 introduisais 300 grammes de gélose. Je portais le tout à 120 degrés pendant 

 une heure et enfin je répartissais le milieu dans des fioles à fond plat d'un 

 litre que je stérilisais à 120 degrés. Dans chaque fiole je mettais environ 

 650 cent, cubes, c'est-à-dire le volume convenable pour une cuvette. 



Le dépôt abondant que contenait ce milieu imposait naturellement la pré- 

 caution de le couler très chaud dans les boîtes, en agitant le mieux possible 

 les fioles qui le renfermaient; mais, après refroidissement, sa surface était 

 aussi solide et aussi unie que celle du milieu de M. Nicolle. De même que 

 cette gélose, il m'a constamment donné, par cuvette, un rendement moyen 

 de 3 grammes de corps microbiens humides ; la toxicité de ceux-ci était la 

 même avec les deux milieux. 



Ces résultats concernant le Proteus^ c'est-à-dire un microbe très facile à 

 cultiver et possédant même, d'après les travaux de certains auteurs, une affi- 

 nité marquée pour les protéoses, il serait prudent de faire un essai en petit 

 avant d'utiliser ce milieu pour la culture en grand d'une autre bactérie. 



Dans toutes mes expériences j'ai récolté les corps microbiens 

 après 18 à 20 heures de culture à 37 degrés ; j'y ai plusieurs fois 

 dosé l'humidité et j'ai toujours trouvé, à quelques décigrammes 



(1) Albert Berthelot, Préparations des milieux de culture par l'hydrolyse 

 alcaline ménagée des substances a Ibumino'ides naturelles. Compte» rendus de 

 la Soc. de Biologie, t. LX'VIII, 30 avril 1910, p. 757. 



