6 G. GILSON 



constituent. C'est pourquoi nous exposerons ici les principaux modes de 

 préparation que nous avons adoptés. 



i° Méthode. 



Nous avons employé la méthode des coupes minces et celle de la disso- 

 ciation sur porte-objets. L'action des agents dissolvants nous a servi aussi 

 dans l'étude de certains détails. 



Coupes. 



Tous les agents fixateurs sont loin de convenir à notre objet : la liqueur 

 de Kleinenberg, l'acide picro-nitrique, les acides nitrique et chromique et, 

 en général, toutes les solutions acides nous ont donné de fort mauvais résul- 

 tats; ces réactifs produisent tous le gonflement des cellules et, par suite, des 

 altérations profondes du protoplasme et des formations spéciales qu'il contient. 



Le bichlorure de mercure, au contraire, donne de bonnes préparations. 

 Nous avons fait usage d'une solution aqueuse à 5 0/0. Après dix minutes 

 d'action nous lavons à l'alcool au tiers, puis nous faisons passer l'objet par 

 une série de cinq alcools de plus en plus concentrés, en le laissant dix mi- 

 nutes dans chacun d'entre eux; enfin nous enrobons à la paraffine. 



Nous avons trouvé préférable de ne colorer l'objet qu'après la confection 

 des coupes sur le porte-objets. 



Les colorants les plus divers nous ont servi soit isolés, soit combinés. 

 Les meilleurs résultats nous ont été fournis par l'action successive de la 

 fuchsine acide et du vert de méthyle. Après avoir appliqué la fuchsine acide 

 en solution aqueuse très diluée, on lave, puis on dépose sur les coupes une 

 goutte de solution glycérinée (1) additionnée d'un peu de vert de méthyle; 

 on place le couvre-objets et on lute immédiatement. Après quelques heures, 

 ou plus tôt, si l'opération est bien conduite, l'élément nucléinien des 

 noyaux a pris une coloration verte; le protoplasme est gris ardoisé et la 

 vésicule radiée, dont nous parlerons plus loin, est rouge. 



On obtient facilement des résultats semblables à l'aide d'autres pro- 

 cédés de coloration multiple, mais il est inutile de les décrire. 



(0 Voici la formule de cette solution : 



Eau distillée ..... 5o gr. 



Glycérine 5o gr. 



Benzoate de soude . . . 20 ctgr. 



Acide acétique 10 gr. 



Voir G. Gilson : Etude comparée de la spermatogénèse chez les arthropodes; /. t Cellule, t. II. 

 I r fascicule, y> 87. 



