Beiträge zur Kenntnis der Physiologie von Spirophyllum fen-nginrum usw. 101 



auflöst. Später gelang mir die Kultur in Erlenmeyerkolbeu, die 

 Leitungswasser, Eisendraht und etwas Extrakt von alten Blättern 

 enthielten. Von dem Blätterextrakt darf nur sehr wenig zugegeben 

 werden. Es sei bereits hier erwähnt, daß derselbe lediglich als 

 Kohlensäurequelle dient, er zersetzt sich unter Entwicklung einer 

 reichlichen Menge Kohlensäure, die das in den Kulturen enthaltene 

 Eisen als Oxydulkarbonat löst. Gibt man nur so viel von dem 

 Blätterextrakt zu, daß die Flüssigkeit deutlich gelb gefärbt ist, so 

 wirkt bereits die organische Substanz hemmend auf das Wachstum. 

 Wenn man den Eisen draht in den Kulturen durch grobe Feilspäne 

 von weichem Eisen ersetzt, so kann man auf diese Weise gute, 

 für viele Zwecke brauchbare Rohkulturen erhalten. 



Bei meinen Arbeiten im Botanischen Institut der Universität 

 Leipzig brauchte ich die Nährflüssigkeit nur mit etwas Wasser der 

 Leipziger Wasserleitung zu impfen, das stets Spirophyllum enthält. 

 Das Wachstum begann meist nach ungefähr 4 Tagen. Impft man 

 Material aus so hergestellten Kulturen wiederholt in sterile Kolben 

 über, so kann man Kolonien von so großer Reinheit erhalten, daß 

 es bei der mikroskopischen Untersuchung kaum gelingt, fremde 

 Bakterien oder andere Organismen zu entdecken. Selbstverständlich 

 ist diese Kulturmethode für exakte Untersuchungen noch nicht 

 brauchbar, da diese nur mit Reinkulturen durchgeführt werden können, 

 deren Nährflüssigkeit von bekannter chemischer Zusammensetzung 

 ist, was bei Anwendung von Blätterextrakt natürlich ausgeschlossen 

 ist. Endlich gelang mir die Herstellung solcher Reinkulturen auf 

 folgende Weise. Ich beobachtete wiederholt, daß die Eisenbakterien 

 vorzüglich gediehen in Lösungen, die gar keine organischen Sub- 

 stanzen enthielten. Es stellte sich später bei genaueren Unter- 

 suchungen heraus, daß gerade darin der Hauptgrund der vielen 

 Mißerfolge zu suchen war, daß ich zu den meisten meiner Kulturen 

 als Kohlenstoffquelle organische Substanz zugab. Spirophyllum 

 ferrugineum gedeiht vorzüglich in einer Lösung, die außer einem 

 geringen Prozentsatz anorganischer Salze nur kohlensaures Eisen 

 enthält, ohne die geringste Spur organischer Substanz. Da die 

 Zahl der Mikroorganismen, die ohne organischen Kohlenstoff ge- 

 deihen, sehr gering ist, so treten Fremdorganismen in solchen 

 Kulturen sehr zurück. Durch fortgesetztes Üb erimpfen in sterile 

 Kolben gelangte ich schließlich zu Reinkulturen, und zwar nicht 

 allzu schwer. Von 5 Kulturkölbchen , die mit Material geimpft 

 waren, das aus einer ll-mal übergeimpften Kultur stammte, er- 



