Beiträge zur Kenntnis der Physiologie von Spirophi/Uum fenvtgineum usw. 103 



Hierauf werden die Kolben gut mit Watte verschlossen und 

 im Dampfsterilisator sterilisiert. Dann werden grobe Feilspäne von 

 weichem Eisen in einem gut verschlossenen Reagensglas im Trocken- 

 sterilisator eine Stunde lang auf ca. 160 '^ erhitzt. Nachdem man 

 die Kolben aus dem Sterilisator genommen hat, läßt man sie 

 mindestens 3 Tage unter einer leicht mit Watte verschlossenen 

 Glasglocke an der atmosphärischen Luft stehen. Hierauf gibt man 

 im sterilen Raum von den sterilisierten Eisenfeilspänen ungefähr 

 0,05 g in jeden Kolben und impft mit einer feinen sterilen Pipette 

 aus einer bereits vorhandenen Kultur oder mit Rohmaterial. Für 

 die Herstellung von Reinkulturen empfiehlt es sich nur junge, schnell 

 wachsende Kulturen, bei denen noch die einzelnen, aus dem Impf- 

 material entstandenen Kolonien zu unterscheiden sind, zum Abimpfen 

 zu verwenden. Es genügt eine sehr geringe Menge von Impfmaterial. 

 Hierauf bringt man die geimpften Kolben unter eine Glasglocke, 

 in die man so viel Kohlensäure einleitet, daß die Luft in der 

 Glocke ungefähr 1 Prozent davon enthält, und setzt die Kultur 

 an einen kühlen Ort. Das Wachstum beginnt ungefähr nach 4 Tagen. 

 Die Spirojj/ujUum- Fäden wachsen als zusammenhängende Decke 

 auf dem Boden des Gefäßes über den Eisenfeilspänen, oder sie setzen 

 sich als feine hellgelbe Flocken an den Wänden des Gefäßes an. 



Die Kulturmethode besitzt folgende Eigentümlichkeiten, die 

 besonders zu beachten sind. Zunächst ist wesentlich, daß Spiro- 

 phyllum in sehr wenig konzentrierter Nährlösung vorzüglich gedeiht. 

 Größere Mengen von Nährsalzen als die angegebenen zuzugehen 

 ist nicht ratsam, da das Wachstum dadurch nur ungünstig beein- 

 flußt wird. Eisen und Nährlösung müssen unbedingt getrennt 

 sterilisiert werden, da sonst aus mir unbekannten Gründen ein 

 Wachstum überhaupt nicht eintritt. Außerdem ist sehr wichtig, 

 daß die Nährflüssigkeit nach dem Sterihsieren einige Tage an der 

 Luft stehen bleibt, damit das Wasser die beim Erhitzen verloren 

 gegangenen Gase, besonders COo und O wieder absorbieren kann. 

 Erst dann darf das Eisen zugegeben werden. Das Eisen muß in 

 Form grober Feilspäne verwendet werden. Das offizineile Eisen- 

 pulver oder mit Wasserstofi' reduziertes Eisen können nicht an- 

 gewendet werden, da diese Eisensorten zu schnell in Oxydhydrat 

 übergehen. Die groben Feilspäne werden von der im Wasser ab- 

 sorbierten Kohlensäure allmählich als doppelkohlensaures Salz gelöst. 

 Der hierbei entstehende Wasserstoff sammelt sich zuweilen in Form 

 von großen Blasen unter der über den Feilspänen wachsenden 



