RESISTANCE DES VERTEBRES INFERIEURS. .303 



(l'^'^,500 à 2 kilos) entre 24 et 48 heures. Avec le charbon à spores, 

 j'employais toujours des cultures d'un jour pour avoir de beaux 

 bâtonnets se colorant d'une façon bien uniforme et peu de spores. 

 J'ai exceptionnellement usé de cultures d'asporogène de deux 

 jours. Une culture était diluée dans G à 8 c. c. de bouillon de 

 veau ordinaire. 



2'^ Le bacille delà septicémie pousse mal sur tous les milieux 

 solides. Je me suis contenté de cultures en bouillon de veau 

 peptonisé à 1 0/0, de 1 à 2 jours. La culture nest jamais très 

 abondante; mais les résultats de l'inoculation de 1 c. c, aux 

 grenouilles ont été si nets qu'il a paru inutile de chercher un 

 meilleur milieu nutritif. 



B. — Mes préparations ont été surtout des préparations 

 de lymphe, faites suivant le procédé recommandé pour le sang. 



Les organes à couper étaient fixés à l'alcool absolu, quelque- 

 fois aussi par le sublimé à saturation et acide. Mais par ce der- 

 nier procédé les granulations acidophiles ne prennent plus aussi 

 bien la teinte de l'éosine. Les organes étaient ensuite inclus 

 dans la paraffine et colorés sur lames. 



C. — Le meilleur mode de coloration de la lymphe est le 

 suivant. Colorer o minutes dans la solution : 



Alcool à 6C». 100 



Eosine à l'eau 0,a 



Lavera l'eau. Colorer 15 à 20 secondes dans une solution 

 aqueuse à 3 0/0 de bleu de méthylène. 



Laver très soigneusement à l'eau et laisser sécher ; puis 

 monter au baume. Les granulations éosinophiles et l'hémoglo- 

 bine se colorent en rose; les noyaux et les microbes en bleu 

 plus ou moins intense; le protoplasme en bleu très clair. 



Quelquefois la coloration à l'éosine, suivie d'un passage au 

 Gram, est excellente pour permettre d'apercevoir facilement les 

 microbes dans une préparation. Enfin, j'ai quelquefois employé 

 le picro-carmin pour, colorer les noyaux, et le Gram pour les 

 microbes. 



Pour les coupes, la coloration au bleu de méthylène ne donne 

 pas de bons résultats. Une double coloration à l'éosine-Gram 

 permet de mettre bien en évidence les grains acidophiles et les 

 microbes; mais les noyaux sont peu ou point nets. 



