598 ANNALES DE L'INSUITUT PASTEUR. 



bénéfice de celle laborieuse série de passages est perdu. Il n'en 

 esl plus ainsi, si l'ensemencemenl estfait dans le bouillon-sérum, 

 comme nous l'avons déjà montré. Notre méthode consiste donc 

 à maintenir dans les cultures la virulence acquise par les passages 

 à travers les animaux. 



Nous sommes partis d'un streptocoque retiré de la fausse- 

 membrane d'une angine. Une culture en bouillon, âgée de 

 30 heures, tuait la souris à la dose de 0,o c. c . en injection sous- 

 cutanée, et le lapin en trois jours, par injection intra-veineuse de 



1 c. c. L'inoculation de la même quantilé sous la peau amenait 

 l'amaigrissement et la mort tardive des lapins. Notre microbe 

 avait donc une virulence moyenne. 



Le sang du cœur d'un premier lapin, tué par injection dans 

 les veines, est ensemencé dans le mélange de sérum humain et 

 de bouillon, et après 48 heures de séjour à l'étuve, la culture 

 est inoculée sous la peau d'un second lapin qui périt en 18 heures, 

 bien qu'il n'ait reçu que 0,.3 c. c. Une nouvelle culture faite 

 avec le sang du lapin n" 2 tue un lapin n° 3 en 12 heures, à la 

 dose de 0,2 c. c. Passant ainsi successivement dans le corps 

 des lapins et dans le bouillon-sérum, le virus est devenu, en 



2 mois, d'une activité si grande qu'un microbe unique, pour 

 ainsi dire, introduit sous la peau d'un lapin, suffit à le faire périr. 

 En effet, diluons une de ces cultures si meurtrières, elle tuera 

 encore les animaux à la dose de un cent milliardième de c. c. Il 

 va sans dire qu'il est extrêmement difficile de trouver, au 

 microscope, un article du streptocoque sur les préparations faites 

 avec cette dilution. Quand on l'inocule en même temps à 4 lapins, 

 un ou deux meurent, tandis que les autres ne montrent aucun 

 signe de maladie. Ceux qui succombent ont péri en 30 heures, ce 

 qui prouve bien que notre dilution est si excessive qu'il n'y a 

 pas toujours de microbe dans la quantité injectée. Ce chijffre de 

 cent milliards, par lequel nous estimons la virulence de la culture, 

 correspond, pour ainsi dire, à une « limite physique », car en 

 diluant davantage, nous n'aurions presque plus de chance d'ino- 

 culer une unité microbienne. Un milliardième de c. c. tue 

 presque tous les lapins qui le reçoivent : un cent millionième 

 amène inévitablement la mort. Dans ces expériences, nous avons 

 fait la dilution de telle sorte que la quantité de liquide injectée 

 fût toujours de 0,1 c. c. 



