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méthode de Gram. On opère comme il suit : Débarrasser la coupe 

 de la paraffine à l'aide du xylol; enlever le xylol par l'alcool 

 absolu. Laisser un quart d'heure dans le carmin de Orlh 

 alcoolisé. Laver à l'eau. Faire agir le violet phéniqué 4 à 

 secondes et ensuite le liquide de Gram 4 à 6 secondes en le 

 renouvelant une ou deux fois. Décolorer par l'alcool-acétone 

 au 1 3. Passer rapidement dans l'alcool picrique. Déshydrater 

 par l'alcool absolu. Éclaircir par le xylol et monter dans le 

 baume. 



Avantages de la méthode de Qram modiliée. — Le principal 

 avantage consiste dans l'usag-e de Talcool-acélone, comme déco- 

 lorant. L'alcool-acétone décolore plus vite et plus sùiement que 

 YalcoûIalmlH employé d'abord par Gram, et avec lequel on risque 

 toujours de rester en deçà ou au delà du degré voulu. 



Celte considération a son importance, puisque la méthode de 

 Gram comporte une signification diagnostique. La décoloration sur 

 lamelle nécessite un mélange moins riche en acétone, parce 

 qu'une préparation sur lamelle est toujours moins bien lixée 

 qu'une coupe, et que, par conséquent, microbes et tissus y pren- 

 t nent moins facilement et y abandonnent plus aisément les ma- 

 tières colorantes. 



Il est singulier que ce fait d'expérience courante ait échappé 

 àla plupart des auteurs, qui recommandent, au contraire, de faire 

 des colorations plus énergiques dans le cas des coupes. La colo- 

 rabilité moins grande des préparations sur lamelles et leur déco^- 

 loralion plus facile tiennent aux deux causes suivantes : d'abord 

 à la dessiccation préalable; ensuite et surtout à la pénétration des 

 couleurs par une seule face de la préparation. On se convaincra 

 facilement du rôle de cette dernière cause en comparant la colo- 

 ration d'une coupe collée sur lame avec celle d'une coupe non 

 collée. Dans le second cas la teinte se produit plus rapidement 

 et se montre toujours plus vive. 



L'alcool-acétone a sur l'/^^nVr </'«///////(', préconisée par Weigert, 

 l'avantage de ne pas s'altérer; c'est donc un réactif qu'on peut 

 conserver indétiniment sans dommage; de plus, il fournit des 

 préparations qui ne brunissent pas à la longue. Enlin la triple 

 coloration est presque impossible à obtenir avec la méthode de 

 Weigert, à cause de la solubilité excessive de l'acide picrique dans 

 l'huile d'aniline. 



