«08 ANNALES DE L'INSTITUT PASTEUR. 



Les préparations à ralcool-acétone ne se décolorent pas par 

 la suite comme celles que donne Vcsseace de giro/le, décolorant 

 excellent, mais doué malheureusement de propriétés réductrices 

 intenses. 



D'autres avantages de la méthode de Gram modifiée consis- 

 tent dans l'usage du violet phéniqué, plus facile à préparer que 

 le violet aniline et absolument inaltérable, et dans l'emploi du 

 liquide de Gram fort, qui communique aux bactéries une teinte 

 plus foncée et une plus grande résistance à la décoloration. 



Nous signalerons enfin la façon dont nous faisons agir le 

 carmin de l'acide picrique ; elle fournit des résultats supérieurs 

 à ceux de la technique ordinaire. 



Méthode directe. 



La coloration directe des préparations sur lamelles et des 

 coupes est api^licable en réalité à tous les micro-organismes, 

 mais il va de soi qu'on doit en réserver l'usage aux bactéries qui 

 se décolorent par les méthodes indirectes (Gram et Ehrlich). 



R éactifs nécessa ires . 

 Thionine phriiiquée : 



Solution saturée de ttiionine dans l'alcool à 50° 10 ce. 



Eau phéniquée à 1 0/0 100 ce. 



Violet de genfiaue phéniquée. 



Eosine alcoolique au tiers. 



A Icool-acétone au tiers, — alcool absolu. — alcool éther (ûa). 



Xylol. — Baume au xjjlol. 



La thionine ou violet de Lauth est une couleur soufrée appar- 

 tenant au même groupe que les bleus de méthylène etde toluidine. 

 Comme ces deux derniers et à l'inverse des dérivés basiques de 

 la plupart des autres séries, elle ne surcolore pas. Etant donné 

 son prix de revient commercialement élevé, elle constitue un 

 produit de collection et non un colorant industriel. Nous avons 

 fait nos premières recherches avec un échantillon qui nous a été 

 obligeamment donné par le distingué chimiste M. Rosenstiehl. 

 Nous avons ensuite étudié la thionine vendue par la maison 

 Merck, de Darmstadt, qui donne des résultats excellents. 



Les avantages de la thionine sur les autres couleurs soufrées 

 sont surtout appréciables dans la coloration des coupes. Grâce 

 à son affinité pour les organismes et à sa faible solubiHté dans 



