TECHNIQUE DES COLORATIONS. 669 



lalcool absolu (surtout lorsqu'elle est fixée sur les bactéries), la 

 thioniiie constitue le réactif colorant le plus énergique et le plus 

 sûr des microbes qui ne prennent pas le Gram. 



Coloration sur lamelles. — Pour la coloration des cultures, nous 

 donnons la préférence au violet phonique, qui teint énergi- 

 qaement et rapidement les microbes. Il suflil, en effet, de le faire 

 agir (après fixation à l'alcool-éther) pendant quelques secondes, 

 une demi-minute au plus, pour obtenir une coloration intense 

 des bactéries. On lave ensuite à l'eau et on examine dans l'eau 

 ou dans le baume après dessiccation. 



S'il s'ag-it de produits patliologiijues étalés sur lamelles, on 

 choisira entre le violet et la thionine. Le violet colore très vite 

 et très fortement, mais aux dépens de la netteté des préparations; 

 la thionine, au contraire, définit admirablement les contours des 

 organismes et des éléments cellulaires, sans jamais surcolorer. 

 Suivant les cas, on s'adressera donc à l'un ou a l'autre de ces 

 réactifs. 



La coloration par le violet demande quelques secondes, une 

 demi-minute au maximum; la coloration par la thionine, une 

 à deux minutes suivant l'espèce microbienne et suivant l'épais- 

 seur du produit étalé sur la lamelle. 



Lorsqu'on a alfaire à une préparation de samj d'abord, on peut 

 obtenir de très belles colorations doubles en faisant agir l'éosine 

 alcoolique au tiers pendant dix secondes, puis la thionine pen- 

 dant quinze secondes. 



Enfin, par la méthode directe, on peut mettre facilement en 

 évidence les capsules du pneumocoque et du pneumobacille. 

 Pour cela on colore d'abord pendant 4 à 6 secondes avec le violet 

 phéniqué, puis on passe rapidement à l'alcool-acétone au tiers. 

 Ce procédé simple donne des préparations très démonstra- 

 tives. 



Coloration des coupes. — Ici la thionine constitue le seul colo- 

 rant à employer. 



La coupe est débarrassée de la paraffine à l'aide du xylol, 

 puis traitée par l'alcool absolu. On fait alors agir la thionine 

 une demi-minute à une minute, suivant le cas. Puis on lave à 

 l'eau, on déshydrate par l'alcool absolu et on monte dans le 

 baume après éclaircissement par le xylol. 



Cette méthode si simple donne toujours d'excellents résul- 



