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ANNALES DE L'INSTITUT PASTEUR. 



de cultures ont dû résulter de germes extérieurs qui se sont introduits dans 

 l'eau au moment de la prise d'échantillon, de l'ensemencement de la géla- 

 tine, etc. 



Je n'ai pas cru, néanmoins, devoir admettre dans toute sa rigueur ce 

 raisonnement a posteriori. Malgré la fréquence inévitable des contaminations 

 par des poussières aériennes, il n'était pas prouvé que toutes les colonies 

 observées avaient cette origine. 



Une eau stérile, introduite dans des milieux convenables et avec des 

 précautions suffisantes, doit laisser ces milieux parfaitement stériles. Aussi 

 longtemps que cette preuve directe ne pourra pas être obtenue à volonté 

 et un nombre de fois illimité, le pouvoir stérilisateur du procédé usité à 

 Oudshoorn, prêtera le flanc à la discussion. 



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Fig. \. 



Mais, il ne suffisait pas d'un dispositif commode pour recueillir les échan- 

 tillons et ensemencer les milieux à l'abri de toute contamination acciden- 

 telle, il fallait encore affirmer que les germes véhiculés par l'eau étaient 

 réellement tués par l'ozonisation. 



A cet effet, les procédés courants étaient encore une fois insuffisants. 

 Des recherches nombreuses, faites dans notre laboratoire, nous ont con- 

 vaincu, depuis des années, qu'on ne peut pas se fier à la culture sur plaque 

 dans de la gélatine tenue à la température moi/enne pour s'assurer de la stéri- 

 lité d'une eau. L'absence de toute colonisation, après un certain nombre 

 de jours, dans une gélatine restée solide, entre lOo et 20°, n'est souvent 

 que l'indice d'une stérilisation apparente. Il suffit de placer les boîtes Pétri 

 à l'incubateur, à 37°, pour y voir apparaître des végétations en 24 à 48 heures. 



Il s'agit, dans tous ces cas, de germes dont la vitalité est affaiblie, de 

 spores parfois, qui rajeunissent difficilement à une température relativement 

 basse et dans des milieux de consistance ferme. 



Or, on voit aisément l'inconvénient grave d'une épreuve faite dans les 

 conditions ordinaires. 11 pourrait se faire que l'action de l'ozone soit insuffi- 

 sante pour entamer la vitalité de certains micro-organismes très résistants, 

 sans les tuer; des germes de fièvre typhoïde, par exemple, pourraient ainsi 

 persister vivants dans une eau, dont un échantillon, ensemencé dans de la 

 gélatine tenue à 20", n'en montrerait aucune colonie. 



