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el o''"',.> d'anligène à i -t- i5 sont addition néiî respectivement de o"^"'', 1 , o"^"'', i5, o^'"",2 



de sérum de cobaye à -:— . Les trois tubes sont mis une heure dans l'éluve à 3"°. 



•' 60 ' 



Chaijue tube est cnsuile additionné de o'^'"', i ambocepteur titré ( ' ) et o""', i globules 

 de mouton lavés, dilués dans un volume égal d'eau physiologique. On remet les tubes 

 dans l'étuve à Z-j". Le lube, dans lequel l'hémolyse totale est obtenue en une demi- 

 heure environ, indiijue le volume de complément nécessaire pour les léaclions à 

 exécuter. 



(Si l'on ne dispose que d'un temps très limité, on peut à la rigueur mettre dans les 

 trois tubes, et en même temps : antigène dilué, complément de cobaye aux doses ci- 

 dessus indi(|uées, ambocepteui-, globules, placer à 3^°, el noter le lube dans lequel 

 l'hémolyse totale est obtenue en une demi-heure. Celle expérience fixe comme précé- 

 demment, avec un peu moins de précision toutefois, le volume de complément dilué à 

 faire intervenir dans les réactions.) 



Les opérations sont alors eflectuées en présence du sérum suspect; à part les témoins 

 habituels, deux tubes seulement sont nécessaires renfermant, le premier : a"^™' eau 

 physiologique -H o'"'', 2 sérum suspect inactivé -H o'"', 3 antigène dilué -h la dose de 

 complément déterminée préalablement; éluve à 3-°, i heure; ajouter o'"'',i ambo- 

 cepteur titré -t-o'^"'',i globules de mouton lavés au demi; éluve à 37" une demi-heure; 

 le second : identique au premier, mais sans antigène. 



Les tubes sonl ensuite centrifugés el il ne reste |ilus qu'à noter et interpréter les 

 résultais obtenus. 



Interprélalion des résiillals. — Nous conseillons à ce point de vue d'avoir recours 

 à l'échelle colorimétrique de Vernes, échelle que l'on peut faire très simplement de 

 la manière suivante : 



Solution aqueuse de fuchsine acide à ,„'„„ 10 



Solution aqueuse saturée d'acide picrique 10 



Eau distillée 100 



cm^ 



cl 



La hoiulion j)ure donne le lube llj, corresjiondant à rhémoi\se totale. Pour les 

 aulies tubes, ou verse 3'''"' d'eau distillée dans 8 tubes à hémolyse, et de la ^oiutioll 

 ci-dessus on met : i^"'',35 pour II,; o""',6 pour llj ; o"^"'°,/l pour 11^; o'"'',25 

 pour II4; ù""". i.j pour H^; o'''"', i pour IL; o''"'',o.5 pour H,; o''"'',025 (c'est-à- 

 dire une goulle, mesurée à l'aide d'un compte-gouttes donnant !\o gouttes einiion au 

 ne deau distillée) pour II,,. Les 9 tubes ainsi obtenus sont agités, additionnés 

 n de 2 gouttes de formol à 4o pour 100, bouchés et étiquetés. 



(') Dans un liavail récent : Sur un point de lechnùjue de la réaction de II asser- 

 /«a«/(, par MM. Paris el Desnioulière {Société française de Dermatologie et de Syplii- 

 ligraptde, séance du i"' février 1912), nous avons conseillé, pour la con?-ervation du 

 sérum de lapin anti-mouton, sa dilution, après titrage, dans une solution de fluorure 

 de sodium isotonique (à", -5 Na ri pour ujoo""'). Nous tenons à signaler- à ce sujet 

 qu'un llacon d'ambocepleur ainsi dilué a pu être conservé, dall^ une airnoire du lalxi- 

 rat<jire, pemlanl un an sans changement de tilie. 



