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substances, probablement de nature alcaHne, avec lesquelles elle contracte 

 une combinaison insoluble dans le cblorofornie. De sorte que, la plupart du 

 temps, un simple traitement au cblorofornie permettra d'obtenir le chromo- 

 gène seul, tandis que l'urobiline restera dans l'urine à l'état combiné. Mais, 

 si Ton acidulé préalablement l'urine, comme l'indiquent la plupart des pro- 

 cédés de recherche de l'urobiline publiés jusqu'à ce jour, l'urobiline, libérée 

 de sa combinaison, entre en solution dans le chloroforme, où elle accom- 

 pagne le chromogène. On peut cependant séparer l'urobih'ne de son chro- 

 mogène en mettant à profit les observations suivantes : 



Une solution chloroformique de chromogène agitée avec une solution 

 aqueuse de phosphate disodiquc, bien neutre à la phlaléine, ne cède rien à 

 celle-ci, tandis que dans les mêmes conditions, l'urobiline passe entière- 

 ment en solution aqueuse. 



Par contre, si l'on emploie une solution de soude très étendue, ou si l'on 

 ajoute quelques gouttes de soude au dixième à la solution de phosphate 

 disodique, le cbromogène passe entièrement dans la solution alcaline. Si 

 Ton acidifie ensuite cette solution par un acide non oxydant par lui-même, 

 comme l'acide phosphorique, et qu'on l'agite avec du chloroforme, le chro- 

 mogène inaltéré repassera en solution chloroformique avec toutes ses pro- 

 priétés. 



Pour faire cette séparation dans une urine, voici comment on peut 

 opérer : 



L'urine est épuisée par du cliloroforme. Le cliloroforme filtré sur du coton bien sec 

 est additionné goutte à goutte d'une solution alcoolique d'acétate de zinc au millième 

 jusqu'à ce que le trouble produit d'abord ail disparu : l'apparition d'une iluoiescenca 

 verte indique la présence de l'urobiline ; dans ce cas, le chloroforme est agité avec quel- 

 ques ceniimètres cubes d'une solution de phosphate disodique (bien neutre à la 

 phlaléine) qui s'emparera de l'urobiline. Le chloroforme soutiré ne donnera plus de 

 fluorescence avec l'acétate de zinc, mais celle-ci apparaîtra dès qu'on ajoutera au 

 mélange une trace d'iode, si le chloroforme contient du chromogène. 



Il résulte de ces observations que le cbromogène de l'urobiline est moins 

 sensible à l'action des alcalis que ne l'est l'urobiline elle-nlême et qu'on 

 peut le retrouver en liberté dans un milieu oii l'urobiline n'existe qu'à l'étal 

 combiné, par exemple dans les urines neutres ou même alcalines, tant que 

 cette alcalinité ne dépasse pas celle des phosphates bimétalliques. Quand 

 1 alcalinité devient sensible à la phlaléine, le chromogène entre à son tour 

 en combinaison et n'est plus enlevé par le chloroforme, mais on peut le 

 mettre en liberté en acidifiant le milieu par l'acide phosphorique. 



