CONTRIBUTION A LÉTUDE DU TKTANOS. 389 



L'existence du poison tétanique dans l'intérieur des bacilles 

 pouvait être prévue depuis les travaux de Buchncr, mais elle 

 n'avait pas été signalée. Une épreuve très simple permet de 

 l'établir. On décante avec le plus grand soin toute la partie 

 liquide d'une culture achevée, de façon à ne recueillir que le 

 dépôt microbien. Les spores ainsi obtenues sont chauiTées à 

 diverses températures, supérieures à 65°, puis additionnées 

 d'eau stérile. Vers le 20^ ou le 20" jour, l'eau où les germes ont 

 séjourné renferme assez de toxine pour que, après filtration sur 

 terre poreuse, elle puisse déterminer chez les cobayes, soit un 

 tétanos mortel, soit un tétanos chronique. Quelques exemples 

 en fourniront la preuve. 



a. — Le dépôt d'une culture de 43 jours dans 50 c. c. de bouillon est 

 chauffé pendant 20 minutes à 67-^, puis additionné de 15 c. c. d'eau stérile. 

 La macération se fait au contact de l'air, à la température de 38". Après 

 21 jours, le liquide est décanté, filtré sur une petite bougie Chamberland, 

 puis évaporé dans le vide jusqu'à réduction à 2 c. c. Ensemencé, ce liquide 

 ne donne lieu à aucun développement. Injecté sous la peau d'un cobaye à 

 la dose de I c. c. il provoque le tétanos et la mort en 20 heures. 



b. — Le dépôt d'une culture de un mois dans 20 c. c. de gélatine est 

 chauffé pendant 15 minutes à 70°, puis mis à macérer au contact de l'air 

 et à la température du laboratoire dans 8 c. c. d'eau stérile. Après 21 jours, le 

 liquide est filtré sur une petite bougie Chamberland, concentré dans le vide 

 jusqu'à réduction à 1 c. c, et injecté ensuite sous la peau d'un cobaye. En 

 moins de 24 heures l'animal devient tétanique et meurt le troisième jour. 

 L'ensemencement du liquide provenant de la filtration est resté stérile. 



c. — Le dépôt d'une culture de 28 jours dans 200 c. c. de bouillon est 

 chaufTé pendant une heure à 80°, puis additionné de 15 c. c. d'eau stérile. 

 On laisse macérer au contact, de l'air, à la température du laboratoire. 

 Après 30 jours, le liquide est décanté, filtré sur terre poreuse, concentré dans 

 le vide et injecté sous la peau d'un cobaye. Au cinquième jour, l'animal 

 présente les premiers signes d'un tétanos qui devient chronique et se 

 termine par guérison. 



La nature du liquide dans lequel ont baigné les spores, et 

 ce fait que la macération s'est effectuée au contact de l'air 

 excluent toute possibilité d'une végétation des germes. La 

 toxine contenue dans les liquides ne provient donc pa-s d'une 

 sécrétion nouvelle, mais uniquement de cette réserve que les 

 bacilles conservaient dans leur intimité et qu'ils ont. cédée 

 par dialyse. Il apparaît ainsi que, malgré le chauffage k 67" 

 70° et même 80'^, les spores recèlent encore une quantité de. 



