504 ANNALES DE L'INSTITUT PASTEUR. 



Les préparations étaient toujours colorées au préalable par le 

 picrocarmiu (dans la plupart des cas, outre ces préparations, j'en 

 faisais encore d'autres, colorées avec l'hématoxyline) et ensuite 

 par la méthode de Gram. Quoique les études se soient étendues 

 jusqu'aux stades très éloignés, allant, avec la bactéridie charbon- 

 neuse, jusqu'à la mort de l'animal, je n'exposerai ici que les 

 phénomènes qu'on observe immédiatement (jusqu'à 10 minutes) 

 après l'injection, et je renvoie à un autre travail la description 

 des faits qu'on observe dans les stades plus éloignés. 



Pour les injections, j'employais toujours des cultures sur la 

 gélose, tout à fait jeunes (âgées de moins de 24 heures), diluées 

 dans du bouillon K Je n'ai pas compté une seule fois le nombre 

 des bactéries injectées. Mais pour donner au lecteur une idée à 

 ce sujet, je décrirai ici le procédé de préparation de mes liquides 

 pour injection. Pour augmenter le plus possible la surface de 

 développement de mes bactéries, j'employais toujours, au lieu 

 de tubes ordinaires à gélose, des tubes d'Esmarch, où la gélose 

 couvrait d'une couche mince toute la surface intérieure du tube. 

 Je les ensemençais avec un liquide très riche en bactéries, que 

 j'obtenais en diluant dans du bouillon le contenu d'un autre tube, 

 ensemencé au préalable d'une manière quelconque. J'employais 

 une quantité de semence suffisante pour mouiller toute la surface 

 de la gélose dans le tube d'Esmarch. Les tubes ainsi ensemencés 

 restaient dans l'étuve de 16 à 22 heures. Après ce temps on trouve 

 toute la surface de la gélose couverte d'une couche plus ou moins 

 épaisse de culture. En versant dans le tube un peu de bouillon 

 et en le secouant, j'obtenais un liquide très trouble, qui contenait 

 beaucoup de bactéries. J'employais pour chaque injection le 

 contenu de deux tubes pareils. 



Les résultats que j'ai obtenus avec les bactéries virulentes 

 du charbon et celles du premier vaccin sont complètement 

 identiques, et je les décrirai ensemble. J'ai sacrifié, pour l'étude 

 des phénomènes jusqu'à 10 minutes après l'injeclion, en tout 

 12 lapins, dont 5 ont servi à l'étude du vaccin et 7 à l'étude 

 du charbon. Les lapins qui ont reçu les bactéries du vaccin, ont 

 été tués 2 1/2, .5, G, 7 1/2 et 10 minutes après Tinjection. Les 



4. Je n'employais pas des cultures en bouillon, parce que je voulais toujours 

 avoir beaucoup da bactéries pour pouvoir les retrouver en abondance sur les 

 coupes microscopiques. 



