eUI NE SE COLORENT PAS PAR LE PROCÉDÉ DE GRAM 



Par m. NICOLLE 



(Travail du laboratoire de M. Roux, à l'Institut Pasteur.) 



La méthode que nous employons repose sur la propriété que 

 possède le tannin d'insolubiliser le bleu de méthylène fixé sur les 

 préparations. Voici comment il convient d'opérer. Les coupes 

 des tissus durcis par l'alcool sont colorées pendant une à trois 

 minutes dans le bleu de Loffler ou de Kuhne. Après lavage à 

 l'eau, on les traite par une solution de tannin au dixième (dont 

 l'action est presque instantanée). Fuis on lave à l'eau, on 

 déshydrate par l'alcool absolu, on éclaircit à l'essence de girofle 

 ou de bergamotte, et on monte dans le baume au xylol, après 

 lavage à fond dans le xylol. 



Dans les coupes ainsi colorées, les microorganismes offrent 

 une teinte bleue intense et les tissus ne sont point surcolorés. Si 

 l'on veut différencier davantage, c'est-à-dire donner encore plus 

 de relief aux microbes, on fait suivre la coloration par le bleu 

 d'une légère décoloration dans de l'eau additionnée de quelques 

 gouttes d'acide acétique. On peut aussi pratiquer des doubles 

 colorations, par exemple avec l'éosine en solution dans le tannin 

 lui-même ; mais ces colorations de contraste n'offrent pas d'avan- 

 tage sérieux et exposent, ici comme dans les autres méthodes 

 au bleu de méthylène, à une décoloration partielle des microbes, 

 inconvénient qu'il faut précisément éviter, puisqu'il s'agit d'orga- 

 nismes difficiles à mettre en évidence. 



Nous avons obtenu d'excellents résultats avec les coupes de 

 morve, de fièvre typhoïde, de hog-choléra, de pseudo-tuberculose 

 cocco-bacillaire, de choléra des poules, de chancre mou (strep- 

 tobacille de Unna), c'est-à-dire avec des tissus contenant les 

 microbes dont la coloration passe, ajuste titre, pour peu aisée. 



