516 ANNALES DE L'INSTITUT PASTEUR 



sur la tyrosinase et que par conséquent les modifications de 

 teinte des liquides d'oxydation dues à sa présence ne proviennent 

 que d'un état différent de coagulation du produit oxydé nous 

 sera fournie par un dosage de ce produit. 



Dans trois matras contenant chacun gv. 5 de tyrosine dissoute dans un 

 litre d'eau on ajoute des doses d'acide borique. 



I gr. 



II 5 gr. 



III 30 gr. 



On additionne ensuite le llcjuide de chacun des matras de 50 c. c. de 

 macération glycérinée de Russule. On fait barboter dans les matras, bouchés 

 au caoutchouc et réunis par des tubes coudés, un faible courant d'air pendant 

 20 heures à la température du laboratoire. Après une demi-heure, les matras 

 II et III ont bruni et ont perdu leur transparence; le I est encore transpa- 

 rent et d'un beau rouge acajou. Au bout des 20 heures on bouche les matras 

 à l'ouate et on porte un quart d'heure à 110" en autoclave pour tuer la dias- 

 tase et aussi stériliser les liquides dont la filtration sera longue et que les 

 microorganismes pourraient envahir pendant ce temps. Après refroidisse- 

 ment on ajoute à chaque matras 10 c. c. d'une solution de chlorure de cal- 

 cium à 10 0/0 stérilisée et on laisse déposer 24 heures. Dans ces conditions 

 la presque totalité des mélanines est précipitée; la très faible quantité qui 

 colore légèrement le liquide surnageant est impondérable. On filtre alors sur 

 petits filtres tarés (T), on vérifie que le liquide filtré ne donne pas de précipité 

 mélanique par addition de CaCF. Les filtres et leur contenu sont séchés à 

 poids constant dans une étuve à 110° et on pèse (A). On cçilcine alors le 

 tout avec précaution et les cendres obtenues sont pesées (B). Le poids de 

 matière organique oxydée = A — (B + T). On a éliminé de la sorte l'erreur 

 possible due à la précipiation des sels de chaux par l'acide borique et aux 

 matières minérales entraînées par les mélanines. Dans ces conditions nous 

 avons obtenu les résultats suivants : 



Poids de matière 

 Acide borique organique oxydée 



' 10 gr. 3465 



II 5.000 gr. 3524 



III 30.000 gr. 3532 



Ces chiffres permettent d'affirmer que l'acide borique n'agit 

 pas comme empêchant de la tyrosinase. Le phénomène quali- 

 tatif observé n'est dû qu'à l'action coagulante de l'acide borique 

 sur les mélanines. Même en présence d'oxalate d'ammoniaque, 

 ies liquides d'oxydation tyrosinasiques qui ont été additionnés 

 d'acide borique brunissent. La précipitation n'est pas complète 

 comme avec les sels de chaux. Nous avons vu de même la for- 



