2 ANNALES DE L'INSTITUT PASTEUH 



Technique suivie. 



Voici le s;cliéma^ dont nous nous sommes rapprochés autant 

 que cela était réellement possible. Les lacunes, inévitables en 

 pareille matière, demeurent négligeables au regard du nombre 

 d'échantillons étudiés [f/uinze) et Ao la quantité de titrages 

 effectués [des centaines). 



On a vu, dans notre travail antérieur, que nous partions 

 toujours, pour le dosage initial, d'une culture en milieu T (1) 

 (vingt-quatre heures à 37 degrés). En réalité, nous faisions, 

 parallèlement, deux cultures-origines. L'une servait à déter- 

 miner la virulence « au départ » ; l'autre iri'ayant donc point 

 passé par l'animal) était additionnée de deux volumes de 

 gélatine à l'eau physiologique (gélatine à 15 p. 100, légèrement 

 alcaline et préalablement fondue). Après mélange intime, on 

 scellait le tube et on le portait à la glacière [luhe 1). Au bout 

 d'un mois, on le retirait, on liquéfiait à une douce chaleur, on 

 prélevait pour ensemencer en milieu T, on scellait de nouveau 

 et on reportait à basse température. La culture-fille {hibe 11)^ 

 après vingt-quatre heures d'étuve, était à son tour additionnée 

 de gélatine et mise dans la glacière (avant l'addition de gélatine, 

 on avait eu soin de prélever la quantité <le liquide nécessaire 

 à un titrage complet). Au bout d'un mois, le tube II était traité 

 comme, jadis, le tube I ; et ainsi de suite. On réalisait, de cette 

 façon, une première série d'expériences, destinée à conserver la 

 virulence par des passages mensuels in vitro, suivis de mise à 

 la glacière après addition de gélatine. Lors de chaque passage, 

 l'activité des germes était, avons-nous dit, évaluée très exacte- 

 ment (inoculation dans les muscles gastrucnémiens des souris, 

 à des doses variées : 1 cent, cube, 1/10 de cent, cube, 1/100 de 

 cent, cube...); nous verrons, bientôt, ce qu'il en advient. 



Il était non moins intéressant de chercher comment se com- 

 porte la virulence quand on supprime tout passage. Une 

 seconde série d expériences, destinée à élucider ce problème, ;i 

 été conduite comme il suit. Le tube I (et, éventuellement aussi, 

 un ou plusieurs des tubes II, III...) ('tait sorti de la glacière 

 tous les mois pour repiquage et remis aussitôt à basse lempé- 



(d) Eau peplonisée à 4 \\. 100 (peptone Cliapol.iul), ^^air-c à 0,o p. 100 cl glii- 

 cosée à 0,2 p. 100, tic réaction lésièrement alcaline au loin-nesoL) 



