302 ANNALES DE L'INSTITUT PASTEUR 



et enfin du tissu pulmonaire lui-même; dans quelques cas nous 

 avons aussi examiné le pus de pleurésies, le sang de la circula- 

 tion générale, etc. 



Pour les crachats nous faisons expectorer le malade dans une 

 boîte de Pétri stérilisée et, immédiatement, un petit fragment 

 est détaché avec un instrument flambé. 



Ce petit fragment, lavé successivement dans plusieurs tubes 

 (7 à 8) d'eau stérilisée, servait ensuite aux examens microsco- 

 piques, aux ensemencements, auxinoculations. Cette technique 

 est d'ailleurs classique pour l'étude des crachats, car elle permet 

 d'éliminer en grande partie les microbes delà bouche. 



Les sécrétions des cavernes, le suc pulmonaire, le sang du 

 cœur étaient recueillis comme d'habitude avec des pipettes 

 flambées qui servaient à aspirer le liquide à travers une paroi 

 préalablement stérilisée par le fer rouge. 



Le matériel, ainsi recueilli avec toules les précautions 

 d'asepsie, était soumis à trois ordres de recherches : examen 

 microscopique à l'état frais et après coloration par des pro- 

 cédés variés; cultures sur différents milieux; inoculations à la 

 souris, au lapin, au cobaye. 



Dans ces ditîérentes manipulations, nous nous sommes tou- 

 jours attachés à employer des méthodes multiples pour pouvoir 

 mettre en lumière le plus grand nombre d'espèces bactériennes. 

 Dans une question aussi complexe, il fallait en effet éviter 

 recueil qui consiste à ne trouver qu'une ou deux espèces bac- 

 tériennes dans un cas où il en existe beaucoup d'autres, ou 

 bien à ne trouver que l'espèce qu'on recherche a priori. 



Les résultats concordants des cultures et des préparations 

 faites directement avec le matériel ensemencé nous prouvaient 

 que notre technique était bonne. Donc, pour chaque cas, on 

 faisait des préparations à l'état frais, des préparations colorées 

 par la méthode de Gram, par le liquide de Ziehl dilué, par le 

 liquide de Ziehl à chaud suivi d'une décoloralion par l'acide 

 nitrique dilué au tiers. 



Les ensemencements pour cultures d'aérobies étaient faits 

 sur tubes de gélose ordinaire, sur tubes de gélose ensanglantée, 

 tubes de gélose ascite et sérum coagulé ; pour les cultures des 

 anaérobies nous avons employé les tubes de gélose sucrée en 

 couche profonde. 



