358 ACADÉMIE DES SCIE^fCKS. 



Préparation du colorant (laclobleu de méthylène |alcooli(|ue ou bleu Cépède). — 

 Mettre un e\cè.s de bleu de méthylène en poudre dans un flacon contenant : acide 

 lactique, 40'""'; eau, 160'="'"; alcool àgS", 800''"''. On peut placer le bleu de méthylène 

 en poudre dans un petit sachet pour éviter tout filtrage. Si l'on veut, on peut conserver 

 l'acide lactique saturé de bleu de méthylène en dilution aqueuse, à part (solution A) 

 et préparer le colorant de la façon suivante : 



Solution A (bleu de méthylène en excès, acide lactique 4o""', 



eau distillée lôo'""" ) i partie 



Alcool à 9.)° 4 parties 



Coloration. — Elle est très rapide. C'est une coloration-type à fond coloré en deux, 

 temps. La lame portant la coupe, ou le frottis de crachat, de sang ou d'urine fixé par 

 la chaleur, reçoit la fuchsine phéniquée. Ch\ colore à chaud avec dégagement de 

 vapeur pendant 5 minutes. On porte, avec ou sans lavage, dans notre lactobleu. 

 Quelques minutes suffisent (2 ou 3, en général). On lave à grande eau. Si la lame n'a 

 plus à l'œil nu qu'une teinte bleue uniforme, la coloration est terminée. Si, par hasard, 

 elle montrait des endroits épais, encore colorés en rouge, il faudrait reverser quelques 

 gouttes de notre lactobleu sur la préparation et attendre encore quelque temps pour 

 obtenir la teinte bleue désirée. Sécher au buvard, puis à la flamme douce. 



Recherche du bacille de Koch dans l'urine. — La technique est légèrement 

 modifiée. Avant la coloration à la fuchsine, la préparation est traitée pendant 5 à 

 10 minutes par une lessive de soude additionnée de 5 pour 100 d'alcool qui enlève 

 la graisse du bacille du smegma et fait disparaître son acido-résistance, alors que la 

 cire du bacille de Koch lui conserve, dans ces conditions, sa propriété caractéris- 

 tique. Le bacille de Koch, très finement coloré, apparaît seul en beau rouge. La flore 

 associée est très joliment teintée en bleu. Les éléments cytologiques ont un aspect de 

 fraîcheur que je n'ai pu leur communiquer par aucune des autres méthodes. A l'œil 

 nu même, la préparation présente un réel caractère de propreté et de finesse. 



Cette méthode, que j'ai fait connaître à de nombreux bactériologues 

 avant de la publier, a remplacé la méthode allemande classique dans un 

 service d'hôpital . 



J'ai pu déterminer le bacille de Koch dans les divers milieux organiques : 

 selles, urines, sang et crachats. Le microbe apparaissait avec toute la finesse 

 désirable dans ses particularités cytologiques : enveloppe cireuse incolore, 

 formes trapues, formes moyennes, formes longues en chapelet, pseudo- 

 spores, etc. 



Dans des cas d'endocardite infectieuse à pronostic fatal, j'ai pu colorer 

 d'une manière très précise le bacille de Koch dans le sang et en particulier 

 dans les phagocytes au cours de la bactériolyse de digestion phagocylaire. 



La rigueur de cette méthode que nous expérimentons depuis plus d'un 



