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Le champignon s'est très bien développé dans ce milieu de culture et 

 au bout de trois semaines environ, il avait atteint son maximum de végéta- 

 tion; nous avons alors prélevé un échantillon de 10 ce. et nous avons dosé 

 l'NHj qui pouvait s'y trouver au moyen du carbonate calcique; mais nous 

 n'avons pu en constater la moindre trace. Il nous était donc permis d'affir- 

 mer que l'ammoniaque ne pouvait provenir d'un simple phénomène de dés- 

 assimilation cellulaire. 



Les analyses successives indiquant la proportion d'ammoniaque pro- 

 duite et d'asparagine transformée, ainsi que les opérations de dialyse, vien- 

 nent à point pour confirmer notre conclusion. 



Nous indiquerons d'abord le mode opératoire que nous avons adopté 

 pour l'étude des transformations de l'azote. 



/. Dosage de /'NH3 libre ou combinée. 



La plus grande difficulté pour effectuer ces diff"érents dosages rési- 

 dait dans l'emploi d'un réactif capable de chasser l'ammoniaque sans 

 attaquer l'asparagine. Pour le dosage de l'asparagine, quelle pouvait être 

 la méthode la plus sûre et la plus rapide pour donner exactement la 

 quantité d'azote correspondante à la quantité de cette substance non encore 

 attaquée? 



Après un grand nombre d'essais, notre choix s'est définitivement fixé 

 sur le CaCO-, qui présente l'avantage de nous livrer toute l'ammoniaque, 

 tout en laissant intacte l'asparagine. 



Pour donner une idée de la valeur de cette méthode, il suffira entre 

 tous nos nombreux essais d'en citer un seul. 



Une quantité déterminée 100 mmgr. de (NH^),S04 desséché renfer- 

 me 25 mmgr. 7 de NH,. 



L'analyse au carbonate de calcium donne 25 mgr. 2. 



L'erreur n'est donc que de 2 0/0, en supposant le sulfate ammonique 

 absolument pur. 



L'asparagine avec le CaC03 ne nous donne rien. 



//. Dosage de l'azote amide — CONH,. 



Quand on distille une quantité connue d'asparagine dissoute, avec de 

 la NaOH concentrée, on trouve dans le distillât sous la forme de NH3 très 

 exaclemcnt la moitié de Papote renfermé dans l'asparagine, dès qu'on a soin 

 d'éviter la fusion de la soude caustique. Des expériences répétées nous ont 

 donné des résultats très positifs à cet égard. 



