FERMENTATION AMMONIACALE DUE AUX MUCEDINEES SIMPLES 299 



///. Dosage de l'azote aminé — H^C — NH.,. 



Au contraire, si on maintient la fusion de la soude caustique pendant 

 un quart d'heure, on obtient l'azote total de l'asparagine. Les expériences 

 faites à ce point de vue ne sont pas moins concluantes ; le seul désagré- 

 ment de cette méthode à la soude caustique en fusion, c'est de ne pouvoir 

 utiliser le ballon que pour une ou deux expériences au plus ; mais elle 

 présente des avantages qui ne sont pas à dédaigner : économie de temps, 

 l'opération durant au maximum une heure; et économie d'argent, en com- 

 paraison avec la méthode Kjeldahl. 



Le radical aminé reste stable pendant la première partie de l'opération. 

 Ce qui nous permet de le prétendre, c'est l'essai à l'alanine qui nous 

 donne un résultat complètement négatif, tandis que tout l'azote passe à la 

 fusion. Ce dernier point ofi'rait un intérêt d'autant plus grand pour nous 

 que, pour éviter une casse inutile de ballon, il suffisait pour doser l'aspara- 

 gine NqN TRANSFORMÉE daus les solutions de nous contenter de la première 

 opération, les causes d'erreur provenant de l'acide aspartique qui aurait pu 

 éventuellement s'y trouver étant ainsi écartées. 



Voici donc la marche choisie pour les dosages successifs d'ammoniaque 

 et d'asparagine. 



Nous prélevons, d'un jour à l'autre, dans des ballons Pasteur renfer- 

 mant les milieux de culture, un échantillon de lo ce. que nous traitons par 

 du CaCOj dans un ballon Kjeldahl muni d'un réfrigérant, pour chasser 

 l'ammoniaque que nous recueillons dans des flacons renfermant des solu- 

 tions titrées d'acide sulfurique N/io, avec le méthyl orange comme in- 

 dicateur; nous filtrons ensuite le résidu de distillation dans un nouveau 

 Kjeldahl et, après lavage soigné à l'eau distillée, nous introduisons 

 quelques morceaux de soude caustique en bâtons et nous distillons en 

 évitant la fusion de la soude. Nous recueillons ainsi la moitié de l'azote 

 de l'asparagine sous la forme d'ammoniaque; il suffit donc de doubler le 

 résultat obtenu pour avoir la quantité exacte d'ammoniaque correspondant 

 à l'asparagine non transformée. L'azote non retrouvé ainsi peut être sous 

 la forme d'acide aspartique ou sous toute autre forme. 



Les ballons Kjeldahl conviennent admirablement à ce genre d'opéra- 

 tion, attendu qu'on peut franchement les chauffer à la flamme nue et que 

 dans ces conditions les distillations se réduisent au minimum de temps : 

 une demi-heure. 



