l82 E. ESCOYEZ 



Nous servant d'un petit microscope à dissection donnant un grossisse- 

 ment de cinq diamètres, nous isolions avec le scalpel toutes les extrémités 

 des filaments, en les coupant à quelque distance de la cellule terminale. 

 Nous n'enrobions donc ainsi que des cellules en voie d'accroissement ou en 

 voie de division. 



Pour enrober ces fragments, il est clair que nous ne pouvions les trans- 

 porter séparément avec des pinces dans les différents liquides. Ce travail 

 eût été beaucoup trop long et eût endommagé beaucoup de matériel. 

 A l'aide d'une pipette, nous transportions les extrémités sectionnées dans 

 un petit dialyseur à membrane semi-perméable. Lorsque la récolte était 

 suffisante pour un enrobage, nous concentrions insensiblement les alcools, 

 puis nous y mélangions du chloroforme. Nous ajoutions ensuite au chloro- 

 forme pur, dans l'étuve à 40^, des blocs de paraffine de volume connu, que 

 nous laissions fondre et se mélanger intimement au chloroforme. Nous ar- 

 rivions de cette façon, petit à petit, à la paraffine pure dans l'étuve à 52°. 



Grâce au dialyseur, le mélange des différents liquides se faisait de façon 

 si lente que nous évitions toute contraction. 



Toutefois, arrivé à la paraffine pure, une nouvelle difficulté surgissait : 

 il s'agissait d'inclure les cellules de Stypocaitlon de façon à pouvoir les cou- 

 per longitudinalement. C'est en effet dans ce sens que se font les divisions. 



Au début, nous faisions, ainsi que Swingle le conseille, passer la pa- 

 raffine du dialyseur, avec tous les fragments d'algue qui s'y trouvaient, dans 

 un petit bac de papier placé sur une lamelle de fer chauffée à une tempéra- 

 ture suffisante pour maintenir la paraffine liquide. Alors, avec une aiguille 

 montée, nous orientions les fragments parallèlement les uns aux autres et 

 nous refroidissions ensuite brusquement le tout. 



Ce travail était très long et très délicat. Au moindre refroidissement, 

 la paraffine se solidifiait, il fallait alors reporter le tout à l'étuve et recom- 

 mencer les opérations. Il se produisait souvent des altérations dans les 

 structures cellulaires par suite d'un trop long séjour dans la paraffine 

 fondue. 



Nous avons employé alors une nouvelle méthode. Nous avons pris un 

 dialyseur plus grand, dans lequel nous introduisions un très grand nombre 

 (plusieurs centaines; de sommets de filaments. Nous changions alors les 

 liquides comme plus haut, mais, une fois nos objets placés dans la paraffine 

 dure à l'étuve de 52°, nous laissions déposer le tout jusqu'à ce que tous les 

 fragments fussent descendus au fond du dialyseur, où la plupart d'entre eux 



