196 ANNALES DE LINSTITUT PASTEUR 



sang de rfinimal. On pouvait penser en effet que les leucocytes 

 provenant dexsudals, tout en conservant leur capacité phagocy- 

 taire, ont perdu leur faculté d'absorption grâce à la (juantité de 

 bouillon qu'ils ont avalé. 



Pour obtenir les leucocytes du sang je me suis servi de che- 

 vaux de l'abattoir municipal, ayant soin de choisir toujours des 

 chevaux bien portants et n'ayant pas plus de huit ans d'âge. 

 Pour avoir des leucocytes à l'état frais je prenais pour chaque 

 expérience une nouvelle portion de sang. 



Pour extraire les leucocytes du sang de chevaux je me suis 

 servi de la méthode HektaL22j en modifiant un peu sa technique. 

 On ajoute au sang, pour en empêcher la coagulation, une solution 

 de citrate de soude à 1,2 p. 100 et de chlorure de sodium à 

 0,8 p. 100. On laisse déposer les globules rouges et on sépare 

 les leucocytes surnageants par centrifugation. D'après les expé- 

 riences de Hekta [22] et Hamburger [23] une solution de citrate 

 de soude à 0,4 p. 100 n'a aucune influence sur l'activité vitale des 

 leucocytes, surtout si ces derniers ont été ensuite lavés avec la 

 solution physiologique. Ordinairement j'ai opéré de la manière 

 suivante : je mettais dans une haute éprouvette 2o0 cent, cubes 

 d'une solution préparée avec le citrate à 1,2 p. 100. Je stéri- 

 lisais le tout à l'autoclave. Ensuite, je recueillais dans cette 

 éprouvette le sang veineux d'un cheval à l'aide d'un trocart 

 muni d'un lube en caoutchouc. J'obtenais de cette manière du 

 sang qui contenait 0,3 p. 100 de citrate de soude. Cette quan- 

 tité suffit amplement pour empêcher la coagulation. 



Je laissais déposer le sang dans cette même éprouvette pen- 

 dant deux heures, temps nécessaire pour que les globules 

 rouges tombent au lond du vase, tandis que les globules blancs 

 restent en suspension dans le liquide trouble. On décante le 

 liquide surnageant dans des tubes, on le centrifuge pendant une 

 demi-minute (centrifugeur électrique). Chaque litre de sang 

 me donnait environ 15 tubes. Après la centrifugation, il se 

 forme au fond de chaque tube un dépôt de globules blancs 

 avec une petite quantité de globules rouges. Pour débarrasser 

 les globules blancs de globules rouges je réunissais le dépôt 

 dans un tube et je le laissai déposer pendant deux heures. Après 

 ce temps, on trouve au fond du tube surtout les globules blancs 

 qui s'agglomèrent facilement, tandis que les globules rouges 



