LA SPERMATOGÉNÈSE CHEZ LES TRITONS 33 



à quelle partie de cette cellule appartiennent les granules ou autres objets 

 colorés que l'on y observe. 



Nous avons donc abandonné ce système pour faire des essais de coupes 

 au microtome à congélation. Afin d'opérer sur des cellules que nul réactif 

 ne pouvait avoir altérées, nous prenions le testicule frais et nous le portions 

 sans autre préparation sur la platine du microtome. Après congélation et 

 refroidissement du rasoir, nous sommes parvenu à faire des coupes et même 

 à les transporter sur un porte objet. Mais les déceptions nous attendaient 

 encore à la fin de l'opération. Les cellules coupées, qui seules eussent été 

 utiles, tombaient, aussitôt réchauffées, en une marmelade, dans laquelle on 

 ne reconnaissait plus rien. 



Force nous a donc été de recourir à la fixation et à l'enrobage. 



Il s'agissait, en somme, dans nos recherches de retrouver les graisses 

 et la lécithine. Donc il fallait à tout prix éviter les dissolvants de ces sub- 

 stances. L'enrobage au collodion était à rejeter à cause du mélange d'éther 

 et d'alcool absolu qu'il exige. Il ne restait donc plus que les enrobages à la 

 gomme ou à la gélatine. Après quelques tâtonnements, nous sommes par- 

 venu à faire des inclusions dans la masse de Kaiser et dans celle de Bru- 

 NOTTi (BoLLES Lee et Henneguy, 1896, p. 217). Nous recommandons vive- 

 ment cette dernière méthode qui nous a permis, après un durcissement de 

 six jours à l'alcool à 90°, de faire des coupes de 25 et même de 20 a. 



Les testicules frais ou, de préférence, leur partie cellulaire seule, sépa- 

 rée de la masse par une section nette à l'aide d'un bon rasoir, étaient plon- 

 gés dans la teinture d'anchusine dans l'alcool à 90'\ Ce liquide fixe assez 

 bien le tissu et colore les graisses, ainsi que la lécithine, en rouge. xAprès 

 sept à huit heures de coloration, les pièces sont portées rapidement dans 

 l'alcool à 90°, puis dans l'alcool 1/3 et enfin dans l'eau. Dès qu'elles tombent 

 au fond du vase, elles sont placées pendant une journée dans un mélange à 

 parties égales d'eau et de gélatine de Brunotti. On les porte ensuite dans 

 la gélatine seule et on les y laisse un jour. Enfin, on coule la gélatine dans 

 une boite en papier quelque peu dur, dont le fond est formé par un petit 

 cube de bois. On la laisse s'y prendre à une température voisine de 8° C, 

 puis on porte le petit bloc dans de l'alcool à 90°. On dispose les choses de 

 telle façon que le niveau de l'alcool n'arrive pas à la hauteur du bord du 

 papier. Au bout de quelques jours, la gélatine a pris une bonne consistance 

 et on peut faire des coupes sous l'alcool à 80°. Les coupes sont portées sur 

 porte-objet et on les colore par le vert de méthyle légèrement acidifié 

 d'acide acétique. 



