LES CINÈSES SEXUELLES CHEZ DIEMYCTILUS TOROSUS 13 



ment, quand le durcissement s'effectue dans la solution de Gilson ; celle-ci 

 donne à l'œuf une consistance plus forte et liquéfie, au contraire, la couche 

 muqueuse qui lui est adhérente. 



La coque des o^ufs de Diemyctiliis est beaucoup plus résistante que 

 celle de nos batraciens; elle se ramollit beaucoup plus lentement dans l'eau ; 

 aussi faut-il laver les œufs à grande eau plusieurs fois, pour en extraire les 

 dernières traces de sublimé. Après lavage, ils étaient passés successivement 

 dans la série des alcools jusqu'à 80 degrés. 



L'enrobage se pratiquait dans la paraffine fusible à 52 degrés, d'après 

 la méthode que nous avons donnée dans nos travaux antérieurs. Nous avons 

 essayé, avec le même succès, plusieurs méthodes de coloration que nous 

 avons exposées auparavant; nous en avons expérimenté une nouvelle qui 

 est plus rapide, plus pratique et plus sûre que les précédentes. 



Les œufs débités en tranches de 4 à 5 .x d'épaisseur étaient colorés par 

 une solution forte d'hématoxyline de Delafield, lavés rapidement dans l'eau 

 pour enlever l'excès du colorant, puis portés dans l'alcool à 80" contenant 

 des traces d'ammoniaque pour donner une teinte bleue à la coloration, 

 ce qui se produit instantanément; de là, plongés dans une solution très 

 diluée de rouge congo dans l'alcool à 80° jusqu'à ce que la coloration 

 rouge se soit substituée au bleu de l'hématoxyline ; cette substitution 

 s'opère assez rapidement et proportionnellement à la force de la solution 

 de rouge congo ; en général après une heure, le virage au rouge est 

 accompli. 



Dans cet état, la préparation est surcolorée et ne se présente pas bien 

 à l'œil; il faut, pour la mettre à point, la décolorer rapidement. On y par- 

 vient aisément en passant les coupes d'abord à l'alcool acidulé légèrement 

 d'acide chlorhydrique; on laisse agir ce dernier jusqu'à ce que la préparation 

 ait pris une teinte bleuâtre et que, en égouttant le porte-objet, on ne voie 

 plus de matière colorante sortir des coupes. On la reporte alors pendant 

 quelques instants dans l'alcool à l'ammoniaque, qui ramène instantanément 

 la teinte rouge à la préparation. 



Le résultat qu'on obtient est le suivant : la nucléine, sous la forme de 

 nucléoles, boules ou chromosomes, a gardé la teinte bleu foncé de l'héma- 

 toxyline, tandis que le protoplasme, les enclaves et toute la partie plasti- 

 nienne de la figure est d'un rouge orangé. 



Cette méthode permet de reconnaître les plus petits fragments de l'élé- 

 ment nucléinien au milieu des enclaves vitellines. 



