HEMOLYSE ET ANTIHEMOGLOBINE 427 



ajouté l'éther, nous nous sommes aperçu qu'il restait toujours des globules 

 rouges plus résistants que les autres et qui, malgré l'eau distillée et l'éther, 

 conservaient leur aspect primitif. 



Ensuite, nous constatons que le Am 2 S0 4 à la demi saturation ne détruit 

 pas tous les globules rouges. En mettant donc le sang laqué à l'éther directe- 

 ment à la demi-saturation de Am 2 S0 4 pour précipiter les pseudo globulines 

 et les stroma, il restera toujours quelques globules rouges non détruits; 

 ceux-ci, n'étant pas attaqués par le Am 2 S0 4 à la 1/2 saturation, passeront 

 dans le filtrat avec l'hémoglobine dissoute. 



En mettant alors le filtrat à la saturation de Am 2 S0 4 pour précipiter 

 l'hémoglobine, ces derniers globules seront certainement détruits, mais 

 toutes les parties constituantes du globule se retrouveront dans la solution 

 d'hémoglobine. 



Nous trouvons là probablement l'explication de l'inexactitude des con- 

 clusions des travaux antérieurs. Cela explique aussi pourquoi nous n'avons 

 pas obtenu des résultats aussi nets au début de nos recherches. Nos expé- 

 riences du début nous servent d'ailleurs d'un précieux contrôle et viennent 

 confirmer les résultats plus nets et plus précis de nos expériences déci- 

 sives. 



Il faut donc absolument attendre que l'action de l'eau distillée et de 

 l'éther ait complètement détruit les globules rouges. Au besoin même, on 

 peut faire un contrôle au microscope. Il est prudent en tous cas de préci- 

 piter au moins une fois l'hémoglobine à la saturation du sulfate ammonique. 



3) On met alors le tout à la demi-saturation de Am 2 S0 4 et on filtre 

 le précipité obtenu. L'hémoglobine reste dissoute et passe. 



4) Le filtrat rouge clair, centrifugé et décanté, est saturé par Am„SO 

 et l'hémoglobine se précipite. 



On filtre le précipité hémoglobinique. Ce précipité, plusieurs fois lavé 

 et reprécipité, est mis dans le dialyseur pendant 36 heures pour écarter toute 

 trace de Am,S0 4 . 



2. Injections. 



La solution d'hémoglobine ainsi obtenue est injectée à deux lapins. 



Dans les observations que nous nous proposons de faire, nous aurons 

 besoin d'un sérum antihémoglobinique riche en précipitines de l'hémo- 

 globine. 



Or, nos prédécesseurs ne faisaient qu'une et parfois au maximum 3 à 4 

 injections d'hémoglobine. Nous avons observé que pour l'antihémoglobine, 



