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souvent cela ne suffit pas, l'hémoglobine doit être rangée dans le groupe des 

 antigènes difficiles. Aussi une première saignée après 4 injections d'une 

 solution d'hémoglobine équivalente à 1 cm 5 de globules rouges ne donnait 

 qu'un sérum très faiblement précipitant pour l'hémoglobine. Au microscope, 

 on ne voyait pas le précipité se former. 



Nous continuâmes donc les injections à 5 jours d*intervalle de façon à 

 ne saigner les lapins qu'après 10 injections d'une solution d'hémoglobine 

 équivalente chacune à 1 cm 3 d'hémoglobine. Après les 10 injections, les 

 lapins donnèrent un sérum antihémoglobinique très riche en précipitines. 



Nous fimes aussi à un lapin une seule injection de 1 cm 3 de globules 

 rouges de bœuf comme tels bien lavés à l'eau physiologique. Ce lapin, sai- 

 gné huit jours après l'injection, donna un sérum très hémolytique pour les 

 globules rouges de bœuf. 



Nous disposons aussi de sérum d'un lapin normal. 



3. Mode et temps d'observation et de mensuration. 



a) Expériences in vitro. Pour mettre en évidence l'action de l'hé- 

 molysine ou de l'antihémoglobine, nous nous servons de petites éprouvettes 

 d'une capacité de 10 cm 3 environ et de diamètres identiques. 



Le sérum à examiner est mis en contact avec les globules rouges du 

 sang, puis on observe à l'œil nu la dissolution de l'hémoglobine par la co- 

 loration plus ou moins forte du liquide. Comme suspension de globules 

 rouges, nous n'employons pas le sang défibriné comme tel, le sérum pou- 

 vant être un facteur troublant. Nous employons, suivant l'exemple de 

 Bordet, des globules séparés de leur sérum et lavés à l'eau physiologique 

 par des centrifugations répétées. Notre suspension de globules rouges se 

 compose donc de globules ainsi lavés et étendus de 10 fois leur volume 

 d'eau physiologique. 



Les différents sérums de lapins, soit normaux, soit hémolytiques, soit 

 antihémoglobiniques, sont employés comme tels. 



Seulement, pour avoir des résultats comparables, nous ajoutons tou- 

 jours dans nos éprouvettes une quantité d'eau physiologique inversement 

 proportionnelle à la quantité de sérum employée. De cette façon, le volume 

 de liquide est égal dans les différentes éprouvettes et nous pouvons facile- 

 ment juger de l'action hémolytique des différentes proportions de sérum 

 employées par la coloration rouge plus ou moins foncée du liquide sur- 

 nageant aux globules, tassés au fond des éprouvettes. 



