C. Fraenkel's Methode der Cultur anaerobiotischer Bacterien. 521 



bringen des Impfstoffes aufgekocht, die bekannten Verdünnungen an- 

 gelegt werden u. s. w. Jedes Rölirchen wird sodann mit einem gut 

 schliessenden, doppelt durchbohrten Gummipfropfen versehen, in welchem 

 zwei rechtwinklig umgebogene Glasröhrchen haften, von denen das eine 

 bis auf den Boden des Reagensglases reicht, während das andere dicht 

 unter dem Gummistöpsel abschneidet. Das wagerechte Stück beider 

 Röhrchen ist vorher an den freien Enden zu einem dünnen Halse aus- 

 gezogen worden, die Fortsetzung des längeren Röhrchens trägt ausser- 

 dem einen Bausch sterilisirter Watte und am Ende einen kurzen Gummi- 

 schlauch zur Verbindung mit dem Wasserstoffentwicklungsapparat. Ist 

 durch das durchströmende Wasserstoffgas die in dem Reagensgefässe 

 befindliche Luft vollständig verdrängt (was in wenigen Minuten zu er- 

 reichen ist ^^*), so wird zuvörderst das kurze, sodann das lange an der 

 dünn ausgezogenen Stelle abgeschmolzen und der Nährboden (falls es 

 sich um Gelatine oder Agar handelt) nunmehr nach v. Esmarch's Roll- 

 methode an den Wandungen des Reagensglases ausgebreitet, was bei 

 Benutzung von Gelatine unter dem Strahl der Wasserleitung, bei Ver- 

 wendung von Agar durch Rollen des Glases in lauwarmem Wasser oder 

 in der warmen Hand geschieht. 



Die strengsten Anaerobien gedeihen, wie F. erprobt, in den so 

 behandelten Röhrchen; nur darf man, um dieses Erfolges sicher zu sein, 

 zwei Vorsichtsmaassregeln nicht verabsäumen : 1) Die Gummipfropfen 

 und Glasröhren in durchaus sterilem Zustande zu verwenden und 2) das 

 Entweichen des Wasserstoffs und das Wiedereindringen der Luft zu 

 verhindern. In ersterer Hinsicht giebt F. einlässliche Vorschriften, 

 deren Kenntnissnahme wir der Einsicht in das Original überlassen 

 müssen, in Betreff des zweiten Punktes empfiehlt F., den ganzen Gummi- 

 pfropfen, sogleich, nachdem man ihn eingefügt, namentlich an den 

 Stellen, wo er dem Reagensglase unmittelbar aufsitzt und um die Glas- 

 röhren herum mit Paraffin (paraffinum solidum II der Pharmakopoe) 

 zu überziehen. — Die Vorzüge des mitgetheilten Verfahren bestehen 

 erstens darin, dass es rasch und ohne jede Vorbereitung jederzeit aus- 

 zuführen ist, ferner in seiner Billigkeit; die directe mikroskopische 

 Untersuchung sowie die Entnahme der Colonien mittels der Platinnadel 

 ist schliesslicli leicht zu bewerkstelligen. Hand in Hand mit der Methode 

 der , Cultur in hohen Schichten fester Nährböden' (Hesse -Liboeius), 

 welche gleichfalls als sehr schätzenswerth zu erachten ist und vor allen 



5**') Während der Durchlcitung des Gases müssen natürliih die Nährböden 

 in flüssigem Zustande sein; die Gelatine (5"o mit 1 'Vo Traubenzucker) stellt 

 man deshalb bei Vornahme der Procedur in Wasser von 37 " C, Agar, welches 

 in 2proc. Lösung (wieder mit 1 " „ Traubenzucker) benutzt werden muss, er- 

 fordert besondere Schnelligkeit des Operirens, da es bei wenig unter 40" 

 wieder erstarrt. 



