Allgemeine Methodik. Züchtung von Hefen. 669 



dm-ch eine dickwandige Giunmiröhre mit Schraubenklemme verschlossen 

 ist'. Cxaplezüski. 



Liildiier (1399) empüehlt znr Unterscheidung- der guten Cul- 

 tur liefe von ,. wilden" Hefen ein neues Verfahren namentlich als Er- 

 satz für die umständliche und doch unsichere Prüfung auf Sporenbildung ; 

 zumal die letzteren Analysen nur qualitativer Natur waren und eine quan- 

 titative Bestimmung des Verhältnisses der einzelnen Arten nicht zuliessen. 



Das neue Verfahren, welches nun L. als Ersatz für die Prüfung auf 

 Sporenbildung vorschlägt und als ..Tröpfchenmethode" einführt, wird 

 folgendermassen ausgeführt. jMan präparirt sich zunächst eine Anzahl hohler 

 Übjectträger, auf denen man mit Vaseline wie gewöhnlich sterile Deckgläs- 

 chen aufgebracht hat. Ferner benöthigt man einige von den bekannten be- 

 festigten kleinen Zeichenfedern, etwas Spiritus und Watte. L. befeuchtet 

 einen kleinen Flock Watte mit Spiritus, i)Utzt damit die Federn und flam- 

 birt mit der angezündeten Watte sämmtliche Federn. Damit sind die Vor- 

 bereitungen erledigt. Gährende Würze kommt direct, Betriebshefe erst 

 nach Vermischen mit steriler Würze zur Untersuchung. Mit der durch das 

 Flambiren sterilisirten und wieder abgekühlten Feder wird eine Probe aus 

 der zu analysirenden Mischung entnommen, das Zuviel ausgespritzt und 

 schnell hinter einander auf der Unterseite eines der sterilen vom hohlen 

 Objectträger abgehobenen Deckgläschen 30-40 kleinste Tröpfchen in Form 

 kleiner Striche aufgetragen. Jedes TrJipfchen lässt sich natürlich in seiner 

 Reihe durch eine Combination von Kopf- und Seitenzahl genau bezeichnen. 

 Um Verwechslungen zu vermeiden, macht L. auf der Rückseite des Deck- 

 gläschens einen Punkt neben den ersten Strich der ersten Reihe. Vor dem Auf- 

 drücken des Deckgläschens wird der Objectträger noch etwas angehaucht, 

 damit genügend Feuchtigkeit im Hohlraum des hohlen Objectträgers vor- 

 handen ist. Die Präparate werden genau signirt und werden am besten bei 

 25*^, im Xothfall bei Zimmertemperatur (langsamere Entwicklung) autlDC- 

 wahrt. Sofortiges Mikroskopiren ist erwünscht, aber nicht unbedingt nöthig. 

 Um während des Auftragens der Tröpfchen ein vorzeitiges Eintrocknen zu 

 vermeiden, ist rasches Arbeiten erforderlich; auch ist es zweckmässig, vor- 

 her Bierprobe und hohle Objecträger kalt zu stellen, wodurch sich noch et- 

 was Wasserdampf aus der Luft auf den Proben condensirt. Auch flache 

 Übjectträger können benutzt werden mit genügend hohem Vaselinering^. 



Bereits am folgenden Tag haben sich aus den ausgesäten Hefezellen 

 (selbst in Bier) Colonien entwickelt, aber nicht wie bei den Plattenverfahren 

 in Kugeln, sondern in flächenhafter Ausbreitung, sodass fast jede Zelle der 



') Der erste Apparat wird von Greiner & Friedrichs in Stützerbach (Thür.) 

 für ca. 7 M. geliefert. Ref. 



") Ref. niüflito hierzu bemerken, dass er die Federn nicht nur mit in Spi- 

 ritus getränkter Watte auswischt und flambirt, sondern auch in Alkohol durch Be- 

 wegen ausspült, einen Ueberschuss abspritzt und den Rest auf der Feder selbst 

 abbrennt. Dreimalige Wiederholung genügt zum Stcrilisiren der Feder. Nach 

 Gebrauch werden die Federn in Wasser abgespült und dann mit Alkohol wie 

 vorher behandelt. War bei der Aussaat die Feder oder das Deckgläschen zu 

 warm, so verlaufen leicht die Striche. Ref. 



