Allgemeine Methodik. Färbung von Ausstrichpräparaten. 627 



mittels Eosin. Nach der Färbung mit Carbolgentiana wird das Präparat 

 mit einer Lösung von (Jod 1,0, Jodkalium 2,0, gesättigte Lösung von wasser- 

 löslichem Eosin in 90proc. Alkohol 20 ccm, destillirten Wasser 200,0) über- 

 gössen. Dieselbe wirkt 4-6 Secunden und wird 2-3mal erneuert. Danach 

 Entfärbung in 1 / 6 Acetonalkohol. 



Direete Methode. 



Diese ist anwendbar für alle Mikrobien, vorzugsweise aber für die- 

 jenigen, welche sich mit indirecten Methoden (nach Gram und Ehrlich) 

 nicht färben lassen. 



N. führt hier einen neuen Farbstoff in die Technik ein, das Thionin 

 oder LAUTH'sche Violett 1 , eine schwefelhaltige Farbe, welche zu dersel- 

 ben Gruppe wie das Methylenblau und Toluidinblau gehört. Wie letztere 

 beide und im Gegensatz zu den meisten andern „basischen" Farbstoffen 

 überfärbt sie nicht. Infolge grosser Affinität zu den Bacterien und schwacher 

 Löslichkeit in absolutem Alkohol (namentlich wenn es an Bacterien ge- 

 bunden ist) stelle das Thionin das energischste und sicherste Färbemittel 

 für Mikrobien dar, welche die Gram'scIic Färbung nicht annehmen. Zu- 

 erst benutzte N. ein von M. Rosenstiel, dann mit vorzüglichem Erfolge 

 ein von Merck in Darmstadt erhaltenes Präparat. 



Färbung von Ausstrichpräparaten. 



a) Von Culturen. Hier zieht N. das Carbolgentiana vor, welches ener- 

 gisch und schnell die Mikrobien färbt. Es genügen einige Secunden bis 

 höchstens 1 Minute zur intensiven Färbung. Abwaschen mit Wasser, Unter- 

 suchen in Wasser oder nach Trocknen in Balsam 2 . 



b) Von pathologischen Präparaten. Hier schlägt N. vor, zu wählen 

 zwischen Färbung mit Carbolgentiana oder Thionin. Das Carbolgentiana 

 färbe sehr schnell und stark, aber auf Kosten der Sauberkeit der Präparate 3 ; 

 das Thionin dagegen definire bewunderungswürdig scharf die Conturen von 

 Organismen und zelligen Elementen ohne jemals zu überfärben. Je nach 

 dem Falle werde man also die eine oder andere Farbe wählen. Die Thionin- 



Schnitten. Bei diesen kommt es ausserdem auch sehr auf die Fixation an. 

 Einige Fixationsmittel, wie z. B. Alkohol, schädigen bei langer Dauer doch wie 

 es scheint die Färbbarkeit (wohl weil sie färbbare Substanzen ausziehen) ; andere, 

 wie Chromsäure wenigstens bei stärkeren Concentrationen, schädigen die Färb- 

 barkeit (vielleicht aus gleichem Grund oder wegen Bildung schlecht färbbarer 

 Producte); noch andere, wie Sublimat, wohl auch Formalin, scheinen die Färb- 

 barkeit (durch eine Art Beizewirkung auf diefixirten Gewebstheile und Bacterien) 

 zu erhöhen. Die allgemeine Erfahrung lehrt, dass man speciell bei schwer nach 

 Gram färbbaren Bacterien, wie Pneumokokken, Schnitte, lange anfärben, ferner 

 gut mit der LuGOi/schen Lösung, welche in Schnitte auch schwerer eindringt, 

 jodiren muss und dann auch intensiver differenciren kann als bei Objecttriipor- 

 präparaten. Bei zu kurzer Einwirkung dringt Farbstoff und LucoL'sche Lösung 

 meist oft nur in die oberflächlichsten Schichten der Schnitte ein. Ref. 



1 ) Thionin und LAüTH'sches Violett sind aber nicht identisch. Ref. 



a ) Ref. freut sich, dass N. die Vorzüge des vom Ref. schon seit langer Zeit be- 

 nutzten und empfohlenen Carbolgentiana so unumwunden würdigt. Ref. 



8 ) Ref. findet im Gegentheil, dass das von ihm benutzte, allerdings etwas 

 stärker carbolhaltigo Carbolgentiana wenig Neigung zu überfärben hat und 

 auffallend klare Bilder liefert - allerdings auch nicht in allen Fällen. Ref. 



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